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dodogougou

铁杆木虫 (正式写手)


[资源] 【交流】关于微流控芯片

今天看见wzf7916发的一个关于微控芯片的交流帖,说是导师要他做微控芯片,是用的PDMS,用电化学分离检测生物分子,但是因为以前是做荧光的,对分离、电化学等等都是从零摸起,压力很大。于是回了个帖子,原帖比较老,要关闭了,版主建议新开一个交流资源帖。那我就来新开一个了哈,抛砖引玉一下,呵呵!虽然现在没在做微流控芯片了,但是对这方面到底还是比较赶兴趣的

我读研的时候是做的微流控芯片,也是用的PDMS。我有两个师兄在做微流控之前都做毛细管电泳传感器的,后来他们在做微流控芯片时都做过一段时间的电驱动分离。

做生物分子分离分析,分析对象还有好些大类,不知道wzf7916是要做氨基酸之类的小分子,还是核酸、蛋白质这样的大分子分析了。我有三个师兄做核酸检测,我和另外一个师兄做蛋白质检测——非均相免疫分析型的。

我的经验是:
1、PDMS有比较强的非特异性吸附,通道需要封闭。
2、电驱动分离不像想像中那么容易控制。PDMS散热不大好,容易发生局部过热的情况(有文章用热敏荧光染料示踪,测量微通道内微流体温度的)。另外,物质泳动的方向当然是跟物质的性质有关,生物大分子的性质可就复杂了。
3、生物大分子的检测应该尽量提供一个温度可控、温和的条件。小分子应该还好,问题是生物大分子。电驱动很容易造成蛋白质变性,蛋白质变性以后可能形成絮状沉淀,也可能因为疏水结合增强、非特异性吸附造成很强很强的背景而无法检测;寡核苷酸链之间的结合会受到温度等多方面因素的影响。

初涉微流控领域的人员,推荐看看方肇伦先生编著的《微流控分析芯片》(科学出版社)。我目前想到的也就这么多了,抛砖引玉,希望有这方面的人员一起来交流交流
wzf7916也不用压力太大,新东西相对来说还是比较容易在某些方面取得进展的嘛!
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感兴趣 abc5710110 微纳尺度全分析

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Originally posted by sairmana at 2010-09-07 19:55:02:
楼主你好啊,我想问一下微流控是不是很难啊,听他们说好像不容易出东西,我刚刚被定了课题,很郁闷啊

微流控也是有很多不同的方向的。微流控芯片的材质、设计、液流控制方式、应用等方面有很多不同的类型,这样就派生出很多可以研究的内容。比如,芯片的设计,不同材质芯片的制备及微通道修饰工艺,不同液流控制方式、通道设计条件下的流体特性、温度变化,芯片在合成化学中的应用、在分析检测中的应用等等。

最难的,我觉得是确定方向。如果是“被定了课题”,那也就是说有了个具体的方向,应该还算好啦!
针对自己的方向多看看文献,遇到什么问题就着手解决什么问题,兵来将挡、水来土掩。问题解决了就是一个阶段性的成果,当前的技术手段解决不了、但是能够阐释清楚、积累经验也是一个工作量。成果不是那个设计优化、应用良好的最终产品,而是一路走来的经验、教训——这是从实验、数据中总结出来的,化郁闷为动力,好好设计实验、认真做实验、注意总结总能有收获的。
另外,如果是硕士生,要求和期望值远没有对博士生那么高的,那就更不需要郁闷了。
7楼2010-09-08 19:37:19
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铁杆木虫 (正式写手)


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Originally posted by wwbrain at 2010-10-13 09:10:51:
前辈呀,多谢分享经验。
楼主您好!请问PDMS芯片分选精子时,发现精子吸附在收集池,不知道怎样处理?

PDMS基底没有经过处理会有很强的非特异性吸附,根据不同的需求选择基底的表面处理方式。分选精子没有做过,不好给建议。但是PDMS基片处理及处理效果的考察方面有很多文章,可以多看看。
10楼2010-10-13 22:17:42
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13楼: Originally posted by ray1050610 at 2011-08-13 16:52:58:
我也是新入微流控的门,当时入门教程是林炳承的微流控芯片实验室,现在要出方案了,果断迷茫了···
我们老板追求的是自己拿自己的方案,同时要新要有分量,现在鸭梨山大,感觉很迷茫,完全一头雾水,想出一个方 ...

呵呵,不知你现在出了方案没有,祝你好运啦!

将微流控芯片用于细胞生物学方面的检测,检测方法通常还是基于常规方法。用微流控芯片进行分选或分离富集然后再进行检测,是为了用源于常规的方法获得优于常规的效果,例如:减小试剂和样品用量、集成操作步骤、克服传质对反应效率和定量准确性的影响、提高检测效率和通量、提高灵敏度等等。

我觉得微流控芯片还是有很多可以做的东西:分选、分离富集、信号表达、信号探测……每一个环节都有很多可以深入研究的内容;有的芯片似乎已经很好了,但是未应用于生物大分子的分析或实际生物样品的检测,那可能是某些方面不适合,借鉴并改进这些芯片及实验设计可能会有大的收获——创新意味着必须一切从头开始。
15楼2011-10-14 00:04:50
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14楼: Originally posted by 墨雨清铃 at 2011-10-13 21:42:32:
我就是wzf的师妹,我师姐已经在PDMS电化学检测上面阵亡了,早就转到玻璃芯片了,微流控芯片是很难出东西的,特别是对实验室条件不好的同学来说就更是难上加难了。

嗯,做微流控芯片对实验室的条件要求确实是挺高的。如果单纯做芯片设计感觉是难出东西。
16楼2011-10-14 00:08:57
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19楼: Originally posted by 笨笨熊很2 at 2011-12-06 12:55:51:
楼主你好!我刚刚上研一,我刚刚开始接触微流控芯片的知识,老板要我们买PDMS做实验,我也不懂,看到阿里巴巴上有油状的卖,不知是不是?好像有粘度区分。想问一下前辈您做这个的时候在哪里买的PDMS,有什么建议吗?

很久很久以前的事了,呵呵,毕业都好多年了,也很多年没有接触微流控方面的东西了。当时是师兄联系买的。只记得是道康宁(dowcorning)的,像AB胶那样有两瓶,按比例混匀、100多度烘箱烘,固化。
20楼2011-12-06 22:16:06
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22楼: Originally posted by imjiangmei at 2012-02-15 19:58:48:
楼主您好!请问您以前也在芯片上做荧光分析吗 那有做过荧光素钠吗

做荧光分析,但是没做荧光素钠。
23楼2012-02-15 20:10:38
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18620829楼: Originally posted by 红魔曼联 at 2012-04-13 08:46:38:
微流控分选细胞,如何分选,芯片尺寸多少呢?

我没做过微流控分选细胞。细胞分选可以设法让细胞因受力情况不同而进入不同的收集池,从而分离开来。比如可以通过设计合适的通道控制液流,使细胞因尺寸不同而在通道内有不同的运动速度(要收集的细胞跟其他类型的细胞要有显著的尺寸差异才行)。

芯片的尺寸跟设计的关系非常大。用于分离、检测还是合成?用于分离小分子、大分子、生物大分子还是细胞之类的“大块头”?用于分析什么?用于合成什么?用电分离、液流分离还是其他分离方法?用什么分析方法?用什么合成方法?通道一条中心大道“横跨南北”,还是一环一环又一环地弯弯绕?……
总之,涉及的问题太多了,不能一概而论。而且微通道中可能还会需要设置所谓的微泵、卡槽之类的不规则东西,微通道本身也可能是不规则构造,所以通道尺寸也不容易单纯通过文字描述写清楚。
以前我用的芯片,整体尺寸比一块载玻片小一些,通道宽度和深度是几十微米。
30楼2012-04-17 13:56:32
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42楼: Originally posted by ffyong at 2018-07-18 08:36:46
建议建立一个群,大家谈论起来更方便,非常感谢dodogougou

哈哈,好久以前发的帖子了,刚刚忽然发现过了那么多年,还有人看到这个帖子了?? 2018年到现在,又有三年过去了 不知道你现在是做什么呢,还在做微流控芯片吗?

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48楼2021-08-20 23:57:09
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47楼: Originally posted by 幼儿虫冲啊 at 2021-06-20 10:55:31
所以有群了吗...

没有群呢,我已经好多年没做微流控芯片了,呃,十几年了 不过现在做微流控芯片的课题组还是有蛮多的。

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49楼2021-08-21 00:03:52
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46楼: Originally posted by 幼儿虫冲啊 at 2021-06-20 10:52:34
你好,我也是做微流控芯片分离小分子物质,电化学进行检测的,已经快做了一年了,什么东西都没有做出来,重复性非常不好,一周可能就出来一两个信号,大部分时间都没有信号,我们师兄师姐都没有做出来信号,就因为我 ...

我们以前用电驱动的话,遇到很多问题。做微流控芯片,因为“微”、因为通道很细,可能会遇到一些预期之外的状况。比如,有没有因为管路细、电阻大导致热量聚集、温度过高;有没有因为管路细,无法保持水平,电驱动、重力驱动叠加,导致液流不稳。
可以做个思维导图,仔细观察、分析,看有哪些可能的干扰因素,怎样避免这些干扰。

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50楼2021-08-21 00:17:25
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45楼: Originally posted by lijianyong at 2020-07-29 09:39:26
您好,请教一下,您是怎么封闭管道的,如果先封闭管道,再用等离子体处理PDMS表面,封闭估计没有效果了吧?非常感谢

我们当时是用的牛血清白蛋白。这个主要也还是看用的什么类型的封闭剂吧,生物大分子类的不是很稳定。

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51楼2021-08-21 00:31:30
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