应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】Tm值高于72度怎么办？
51/1返回列表
查看: 2282  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

luckyyan

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】Tm值高于72度怎么办？

小弟最近要扩段基因，但是退火温度软件给出的是75度左右。请各位高手指教一下该怎么办。由于必须从该位点起始，所以换引物不太可行。先谢过了~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-23 22:05:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gn2003_0

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有点高，但是你先这么设计引物，做梯度看看
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-01-24 09:02:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
引物长度是多少啊？
赞一下 回复此楼
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2010-01-23 22:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

towindflower

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 1-24 00:31
其实你是可以不从你设计的实验的ATG位点开始PCR的，因为你是从CDNA扩增的完全可以从Cdna的序列开始设计，因为前面没有没有ATG应对蛋白表达没有影响，你的TM值太高，扩增会有问题，建议做温度梯度，或者用专门的高GC PCR buffer。
赞一下(11人) 回复此楼
3楼2010-01-23 22:28:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 1-24 00:31
生物学科是实验学科，做完了如果不行再找原因吧，我们的引物80度的Tm用53度都扩出来过
赞一下(11人) 回复此楼
闹太套
4楼2010-01-23 23:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +3 Lanmanbaby 2026-08-09 3/150 2026-08-09 13:39 by WH3796
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +13 且听虎啸 2026-08-07 16/800 2026-08-09 13:28 by 天神眷顾
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +8 布布和一二 2026-08-08 15/750 2026-08-09 11:33 by 布布和一二
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +3 布布和一二 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:15 by Lightingo
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:27 by oEVWOejN9taj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭