| 查看: 872 | 回复: 3 | |||
[交流]
【求助/交流】叶绿体完整度 已有2人参与
|
| 各位虫友，叶绿体完整度如何测定，谢谢啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有8人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 2012年度国家科技支撑计划与863的5个领域的备选项目
已经有330人回复
- 乙酸乙酯的旋蒸温度
已经有26人回复
- 基因定位--叶绿体-线粒体-细胞核？？？
已经有12人回复
- 什么样的叶绿体叫做完整叶绿体？如何测定叶绿体的完整程度？
已经有6人回复
- 请教：叶绿体、线粒体、细胞核DNA的相互关系
已经有7人回复
- 求助叶绿体线粒体分离提取
已经有11人回复
- 问有人会提叶绿体蛋白组吗？！（玉米更好）
已经有4人回复
- 【求助】怎么提高单晶数据的完整度？
已经有29人回复
- 【请教】晶体的完整度由什么决定 为啥有的才75% 还有re值是怎么回事 谢谢啦
已经有16人回复
- 【求助/交流】跪求小麦叶绿体DNA的提取方法
已经有5人回复
- 【求助】关于数据完整度的问题
已经有12人回复
- 【求助】生物利用度和药效的关系
已经有11人回复
09021122
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2064.5
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 518
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 856621
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 系统生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
卢高飞(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-19 18:05
卢高飞(金币+3,VIP+0): 1-20 23:28
卢高飞(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-19 18:05
卢高飞(金币+3,VIP+0): 1-20 23:28
|
二、叶绿体被膜完整度的测定 【原理】 由于铁氰化钾不能透过被膜，故完整叶绿体在等渗介质中不能进行铁氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体，铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理，比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率，就可计算叶绿体被膜的完整度。 【仪器与用具】 氧电极测氧全套装置（见实验20）；烧杯；微量进样器；洗耳球等。 【试剂】 测定介质Ⅰ和Ⅱ 见一。 100mmol/L铁氰化钾：称3.29g铁氰化钾溶于水，定容至100ml。 100mmol/L NH4Cl：称0.54g NH4Cl溶于水，定容至100ml。 适量叶绿体（20～50μg Chl/ml反应体系）。 【方法】 1．取0.1ml叶绿体提取液加到0.9ml的蒸馏水中并搅拌1min，使叶绿体被膜胀破，加1ml测定介质Ⅰ悬浮备用。 2．取0.1ml未胀破叶绿体提取液加入反应杯中，视反应杯体积加入测定介质Ⅱ，加入适量铁氰化钾和NH4Cl，使铁氰化钾和NH4Cl的最终浓度都为1mmol/L。搅拌，平衡1min，照光测定Hill反应放氧速率，记录5min，然后清洗反应杯。 3．将已胀破叶绿体加入反应杯中，再加入适量测定介质Ⅱ、铁氰化钾和NH4Cl，使反应体系物质最终浓度同未胀破叶绿体测定体系，测定过程同2。 4．分别计算胀破和未胀破的叶绿体测定体系中单位时间的放氧量(或Hill反应速率)。 5．计算被膜完整度。 被膜完整度（%）= 式中 A－胀破叶绿体单位时间内的放氧量（或Hill反应速率） B－未胀破叶绿体单位时间内的放氧量（或Hill反应速率） 【注意事项】 1. 本实验所用试剂要存放在冰箱中，存放时间不宜过长，最好现配现用。 2. 叶绿体的分离要在0～4℃下进行，玻璃器皿和溶液都须预冷，操作要快，整个分离过程最好在5min内完成。 3. 离心过程中离心机的转速不宜过高，否则叶绿体中的淀粉粒会打破叶绿体被膜。 4. 被膜完整度的测定过程中，反应杯内破碎叶绿体与完整叶绿体的叶绿素含量应相等。 |
2楼2010-01-19 17:09:36
louyiceng
荣誉版主 (知名作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 10.921
- 金币: 19042.7
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 6329
- 在线: 337.6小时
- 虫号: 34457
- 注册: 2004-01-27
- 性别: GG
- 专业: 有机分子功能材料化学
3楼2010-04-25 18:41:12
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
4楼2010-04-25 21:09:56
