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dcb005

金虫 (著名写手)

[交流] 求双酶切,分步酶切的具体操作步骤

第一次酶切结束后如何沉淀,在做第二次酶切,第二结束后也是同样的沉淀么?想找详细操作步骤!采用了6个金币奉送,虫友帮忙!
★穷则独善其身,达则兼济天下★
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风荻

金虫 (小有名气)

dcb005(金币+2):xx 2010-05-28 23:22:24
如果分步酶切的话,最好准备足量的质粒或目的片段。
在酶切中,如果有一个酶的效率很低的,就先用效率低酶大量的切,然后胶回收已切开片段,再用效率高的酶切,这样的话,可以在很大程度上降低空载或假阳性率
7楼2010-05-28 10:28:55
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风荻

金虫 (小有名气)

dcb005(金币+1):xx 2010-05-28 23:22:33
尤其是当你切得两个酶切位点很近(比如都在多克隆位点上),看不到切下来的小片段时,最好先用低效的切
8楼2010-05-28 10:30:43
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