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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】植酸酶活力测定
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04swlcm

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】植酸酶活力测定 已有2人参与

大家好！
我想请教一下，在常规的钒钼磷法植酸酶活力测定过程中，对照组和实验组加入终止液后都出现乳浊液状态，无法测量吸光值，目测有颜色对比，4000rpm-10min后，上清测量值为负，
我想请问有朋友做过植酸酶有遇到过这样的问题没？怎么解决的？
我用的植酸钠是Sigma-P0109型。PH5.5，0.25m的乙酸缓冲液稀释酶液100倍。
体系是：稀释后的酶液250ul+750ul乙酸缓冲液+2ml植酸钠底物+2ml颜色终止液
请大家帮忙啦！谢谢~~~~
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1楼 2010-01-04 20:02:34
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delia1013

木虫 (著名写手)
04swlcm(金币+1): 2010-03-24 21:34
04swlcm(金币+1): 2010-03-24 21:42
04swlcm(金币+1): 2010-05-05 21:33:35
04swlcm(金币+2): 2010-05-20 21:45:15
一般光学法测量忌讳出现浑浊，沉淀等，这样很不准，数据不可信。
首先得搞清楚产生浑浊的原因~
你的这个体系模式还是比较常见的，查找文献多看看再动手！
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2楼2010-03-24 17:38:51
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yongcheng

铜虫 (初入文坛)
我也遇到了这种问题，请问04swlcm  找到原因了吗
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3楼2010-05-02 10:25:47
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04swlcm

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yongcheng at 2010-05-02 10:25:47:
我也遇到了这种问题，请问04swlcm  找到原因了吗

恩，新学期来测量酶活就没有沉淀了，我的原因可能是氨水过期了，因为我就换了氨水就没沉淀了，很奇怪的呢。你要确保你的没一种试剂没问题。
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4楼2010-05-05 21:36:22
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