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04swlcm

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】植酸酶活力测定 已有2人参与

大家好!
我想请教一下,在常规的钒钼磷法植酸酶活力测定过程中,对照组和实验组加入终止液后都出现乳浊液状态,无法测量吸光值,目测有颜色对比,4000rpm-10min后,上清测量值为负,
我想请问有朋友做过植酸酶有遇到过这样的问题没?怎么解决的?
我用的植酸钠是Sigma-P0109型。PH5.5,0.25m的乙酸缓冲液稀释酶液100倍。
体系是:稀释后的酶液250ul+750ul乙酸缓冲液+2ml植酸钠底物+2ml颜色终止液
请大家帮忙啦!谢谢~~~~
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delia1013

木虫 (著名写手)

04swlcm(金币+1): 2010-03-24 21:34
04swlcm(金币+1): 2010-03-24 21:42
04swlcm(金币+1): 2010-05-05 21:33:35
04swlcm(金币+2): 2010-05-20 21:45:15
一般光学法测量忌讳出现浑浊,沉淀等,这样很不准,数据不可信。
首先得搞清楚产生浑浊的原因~
你的这个体系模式还是比较常见的,查找文献多看看再动手!
2楼2010-03-24 17:38:51
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yongcheng

铜虫 (初入文坛)

我也遇到了这种问题,请问04swlcm  找到原因了吗
3楼2010-05-02 10:25:47
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04swlcm

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yongcheng at 2010-05-02 10:25:47:
我也遇到了这种问题,请问04swlcm  找到原因了吗

恩,新学期来测量酶活就没有沉淀了,我的原因可能是氨水过期了,因为我就换了氨水就没沉淀了,很奇怪的呢。你要确保你的没一种试剂没问题。
4楼2010-05-05 21:36:22
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