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【求助/交流】有关western blotting的求救
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liwen410
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[交流]
【求助/交流】有关western blotting的求救
已有7人参与
本人是一个新手,最近两个月都在做western blotting检测目的蛋白的表达。但是结果不理想。因为目的蛋白表达得很少,显影显不出来,显色更显不出来。有一次显出来,但接着又重复不出来。即便显出来,那个条带也是隐隐约约的,因为背景太强了。找了很多原因,包括:增加蛋白上样量,膜多洗几次,等等。效果都不理想。实在不知道问题出在哪里。有时觉得是不是自己真的不适合做科研呢?
在下虚心向各位高手请教,万分感谢。
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1楼
2009-12-15 20:41:44
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lixinna2009
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专业: 农业昆虫学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
如果是弱的带可以增加蛋白上样量,在没有就应该是你抗体的原因,而且一般背景都不会太深,要是太深说明抗体质量不好
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8楼
2011-03-30 10:51:43
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三磷酸腺苷
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虫号: 551611
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专业: 神经系统肿瘤(含特殊感受
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
有时候是你的蛋白特别难做而已……或者抗体不大好
在做什么蛋白呢?用的哪个公司的抗体。说不定论坛里有人做过可以给你建议
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2楼
2009-12-15 20:57:54
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liwen410
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虫号: 922051
注册: 2009-12-07
先谢谢三磷酸腺苷了,我也不知道是我的蛋白难做,还是技术不到家。
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3楼
2009-12-15 21:15:19
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liyingye001
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虫号: 962116
注册: 2010-03-05
专业: 细胞增殖、生长与分化
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
我也出现同样的问题,求高手指教
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5楼
2011-03-20 17:54:12
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