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兜兜1280

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于DNA的提取纯化的问题

各位，我提取的DNA是要做southern用，提的是甘蓝的DNA
我用的是CTAB法，但是OD260/280比值总是在2.2之外，而且浓度也不高
1）哪位能给我个比较详细具体的方法，能够得到纯度高的DNA
2）DNA的纯度是怎么检测的，标准是什么，OD260nm/280nm 260/230nm 要在什么范围才达到标准

麻烦各位能发个详细的步骤给我最好是有电子版的直接发我邮箱里不甚感激sugarain@126.com

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1楼 2009-12-13 17:46:34

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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)

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amisking(金币+3,VIP+0): 12-13 20:16
兜兜1280(金币+2,VIP+0): 12-14 20:21

建议用试剂盒，现在都已经很便宜了。

自己瞎琢磨，有种闭门造车的感觉。

不过道理还是要搞明白，普通的分子生物学书，实验操作手册都已经说的很清楚了。

[ Last edited by hihoney on 2009-12-13 at 17:50 ]

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2楼2009-12-13 17:48:33

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jlzkchong

新虫 (初入文坛)

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兜兜1280(金币+1,VIP+0): 12-17 08:55

不知道你的CTAB法事用氯仿异戊醇抽提几次？！我们抽提两次，吸取上清液的时候不要把中间液面的蛋白成分过多的吸上去，枪头的吸力太大的话，可以把枪头的尖端部分稍微剪去一些，这样再吸取上清液的时候可以减少液面的剪切力，我们提取的DNA最终260/280都在1.8-2.0之间，还算比较理想的~希望对你有帮助~

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3楼2009-12-13 19:19:52

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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by jlzkchong at 2009-12-13 19:19:
不知道你的CTAB法事用氯仿异戊醇抽提几次？！我们抽提两次，吸取上清液的时候不要把中间液面的蛋白成分过多的吸上去，枪头的吸力太大的话，可以把枪头的尖端部分稍微剪去一些，这样再吸取上清液的时候可以减少液面 ...

你好！我提植物的基因组也是OD260/280比值也在2.0以外，能麻烦把你的方法告诉我下？基因组效果不好，会影响PCR效果，非常感谢
我的邮箱：hwj_0919@126.com

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4楼2009-12-16 15:04:28

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