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汕头大学海洋科学接受调剂
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兜兜1280

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于DNA的提取纯化的问题

各位,我提取的DNA是要做southern用,提的是甘蓝的DNA
我用的是CTAB法,但是OD260/280比值总是在2.2之外,而且浓度也不高
1)哪位能给我个比较详细具体的方法,能够得到纯度高的DNA
2)DNA的纯度是怎么检测的,标准是什么,OD260nm/280nm 260/230nm 要在什么范围才达到标准



麻烦各位能发个详细的步骤给我  最好是有电子版的直接发我邮箱里  不甚感激sugarain@126.com
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松上云雀

木虫 (正式写手)

可以到学术期刊网查找别人的硕士或博士论文,上边有详细的protocol。
5楼2009-12-16 16:18:46
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查看全部 15 个回答

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 12-13 20:16
兜兜1280(金币+2,VIP+0): 12-14 20:21
建议 用试剂盒,现在都已经很便宜了。

自己 瞎琢磨,有种闭门造车 的感觉。

不过道理还是要搞明白,普通的分子生物学书,实验操作手册都已经 说的很清楚了。

[ Last edited by hihoney on 2009-12-13 at 17:50 ]
2楼2009-12-13 17:48:33
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jlzkchong

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 12-13 20:16
兜兜1280(金币+1,VIP+0): 12-17 08:55
不知道你的CTAB法事用氯仿异戊醇抽提几次?!我们抽提两次,吸取上清液的时候不要把中间液面的蛋白成分过多的吸上去,枪头的吸力太大的话,可以把枪头的尖端部分稍微剪去一些,这样再吸取上清液的时候可以减少液面的剪切力,我们提取的DNA最终260/280都在1.8-2.0之间,还算比较理想的~希望对你有帮助~
3楼2009-12-13 19:19:52
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jlzkchong at 2009-12-13 19:19:
不知道你的CTAB法事用氯仿异戊醇抽提几次?!我们抽提两次,吸取上清液的时候不要把中间液面的蛋白成分过多的吸上去,枪头的吸力太大的话,可以把枪头的尖端部分稍微剪去一些,这样再吸取上清液的时候可以减少液面 ...

你好!我提植物的基因组也是OD260/280比值也在2.0以外,能麻烦把你的方法告诉我下?基因组效果不好,会影响PCR效果,非常感谢
我的邮箱:hwj_0919@126.com
4楼2009-12-16 15:04:28
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