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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于DNA的提取纯化的问题
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doris0520

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以做DNA沉淀进行浓缩，有专门的试剂盒，大体原理就是乙醇沉淀
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11楼2009-12-25 17:04:12
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yeyw04

新虫 (小有名气)
植物基因租需要考虑把细胞壁破坏，需要增加一些新的试剂。查查文献或分子克隆！
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12楼2009-12-25 20:47:37
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lixin0622

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是蛋白含量太高了吧，再抽提试试，吸取上清的时候一定要用小量程的移液器慢慢吸。我们的OD260/280一般认为1.8左右比较好，OD230是背景盐度，能反映出你对DNA清洗的程度
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13楼2009-12-25 23:32:00
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fighter09

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
手工题的话需要注意的操作很多，分子克隆上讲的很清楚（小木虫上有电子版的，很不错可以看下）。建议用试剂盒提吧，方便效果还不错。一般两个多小时就可以提完了。OD260nm/280nm 参考六楼那位专家的在1.8附近。蛋白还有一种测法是在225nm和215nm的关系计算的。
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14楼2009-12-26 09:29:00
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兜兜1280

铜虫 (小有名气)
谢谢各位啦
不过我发现有这么几个问题，很多朋友说应该注意：
1.沉淀要尽量挑出，比离心沉淀效果好很多
2.我离心都是在4°，不过据说有的离心步骤温度不能太低，要室温
3.酚氯仿异戊醇比氯仿异戊醇效果好很多
各位对此怎么看呢，以上是决定性的注意事项么

还有啊，各位1.5离心管一般能提出多少微克呢，我一般只能提10~20微克，感觉好少啊

[ Last edited by 兜兜1280 on 2009-12-28 at 11:08 ]
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15楼2009-12-28 11:01:47
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