| 查看: 772 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助】葡聚糖G-15测定寡肽分子量
|
|||
|
葡聚糖凝胶G-15，玻璃层析柱：70cm×1.6cm，流动相超纯水，流速：0.5mL/min，检测波长280nm。 标准品：牛血清白蛋白组分五 MW68000，VB12 MW1335，氧化型谷胱甘肽 MW635，L-酪氨酸 MW181. ------------------------------------------------ 问题：1.牛血清蛋白组分五一直没有出现过洗脱峰，但在普通分光光度计280nm有吸收。这是为什么？ 2.VB12、氧化型谷胱甘肽、L-酪氨酸三者的洗脱体积依次为135mL、97mL、142mL，也就是说分子量最大的VB12的洗脱体积比氧化型谷胱甘肽的洗脱体积还要大，理论上说是不可能的，重复试验依然是同样的结果。这是为什么？ 对于第一个问题我想是因牛血清组分五的分子量远大于G-15分离上限而导致根本不能通过层析柱造成，这样解释不知道对不对？第二个问题至今没解决，对以上两个问题希望高手虫友帮忙分析一下！！在此先谢过了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
博士生招生
已经有15人回复
-
索氏抽提奶粉脂肪，结果偏低何故？
已经有1人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有216人回复
-
肠道菌分离后形态差异大，测序却相近？
已经有3人回复
-
Help: SSRN无法打开，如何删除预印本？寻找能登录 SSRN 的人 或 方法
已经有4人回复
-
英国利兹大学食品科学与营养学院博士研究生招聘（CSC联合培养）
已经有8人回复
-
求助新西兰租房签证
已经有0人回复
-
葡萄糖溶液喷雾干燥
已经有4人回复
-
凯氏定氮测粗蛋白：空白管竟藏大秘密
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2009-09-14 15:12:33
chn12503171
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 184.5
- 散金: 264
- 红花: 2
- 帖子: 474
- 在线: 59小时
- 虫号: 749881
- 注册: 2009-04-16
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
3楼2009-09-19 16:19:11
4楼2009-09-19 17:28:46
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lwb1987521(金币+1,VIP+0):感谢您的支持，欢迎常来食品版 11-7 15:30
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lwb1987521(金币+1,VIP+0):感谢您的支持，欢迎常来食品版 11-7 15:30
|
关于凝胶过滤色谱，你的大分子不出峰的解释，肯定是不对 sephadex G-15,理论上讲，分子量越大，出峰时间约早，你的68000的峰应该在一个洗脱体积1/3处，即50ml左右出出峰，不出峰的原因， （1）首先看看你的柱子装得是否合适，比如是否有气泡，是否有断层，这些都会影响正常的出峰时间和出峰的峰行及分辨率 （2）你的上样量是否足够，一般情况下，sephadex G-15的本身分辨率就不是很高，很难有尖锐的峰，也就是意味着，浓度大量被分散，如果你的上样量很低，那么被分散后，就可能测定不到。正常情况，请十倍稀释后看看紫外是否有吸收，如果没有吸收，那说明你的上样量太低了 （3）VB12本来就不应该作为这个系列的标准品 |
5楼2009-09-20 13:06:57
6楼2009-09-24 15:39:33
7楼2009-09-24 15:51:26
★
lwb1987521(金币+1,VIP+0):鼓励新虫发帖阐述自己的问题和观点 11-4 11:32
lwb1987521(金币+1,VIP+0):鼓励新虫发帖阐述自己的问题和观点 11-4 11:32
|
反馈结果，用杆菌肽(Mw=1442)、氧化型谷胱甘肽(Mw=612)、还原型谷胱甘肽(Mw =307)做标准品做标曲，结果也很不理想，现在我在想应该是凝胶的问题，凝胶不好才导致这样的问题。奸商用国产次品充当进口法玛西亚的凝胶？ 后来我就用HPLC的反相Ｃ１８柱做，收集单峰进行质谱分析，但发现两种质谱仪测定的分子量竟有很大的差异，请各位看看下面链接里具体的说明，并请帮忙分析一下。因为我想大家如果做这方面相关内容的话，应该对我下面这些比较感兴趣或者已有相关研究，请不吝赐教！ http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1639750&pid=16416803&page=1 |
8楼2009-11-03 13:54:51