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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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过而知之者

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】葡聚糖G-15测定寡肽分子量

葡聚糖凝胶G-15,玻璃层析柱:70cm×1.6cm,流动相超纯水,流速:0.5mL/min,检测波长280nm。
标准品:牛血清白蛋白组分五 MW68000,VB12  MW1335,氧化型谷胱甘肽  MW635,L-酪氨酸  MW181.
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问题:1.牛血清蛋白组分五一直没有出现过洗脱峰,但在普通分光光度计280nm有吸收。这是为什么?
           2.VB12、氧化型谷胱甘肽、L-酪氨酸三者的洗脱体积依次为135mL、97mL、142mL,也就是说分子量最大的VB12的洗脱体积比氧化型谷胱甘肽的洗脱体积还要大,理论上说是不可能的,重复试验依然是同样的结果。这是为什么?

对于第一个问题我想是因牛血清组分五的分子量远大于G-15分离上限而导致根本不能通过层析柱造成,这样解释不知道对不对?第二个问题至今没解决,对以上两个问题希望高手虫友帮忙分析一下!!在此先谢过了!
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过而知之者

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by peakfly at 2009-9-19 17:28:
取杆菌肽(Mw=1442)、氧化型谷胱甘肽(Mw=612)、还原型谷胱甘肽(Mw =307)、牛血清白蛋白(Mw=68000)

==
谢谢指教。我觉得这个MW68000的牛血清蛋白分子量是不是太大了,我之前用它上柱,出来了好几个峰,我都不知道怎么计算洗脱体积了。
6楼2009-09-24 15:39:33
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查看全部 8 个回答

过而知之者

银虫 (小有名气)

都没人顶一下,自己顶。有做过的说说呀
2楼2009-09-14 15:12:33
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chn12503171

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
标准品全部用多肽试试啊
3楼2009-09-19 16:19:11
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peakfly

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lwb1987521(金币+1,VIP+0):感谢您的回帖,欢迎常来食品版 11-7 15:30
取杆菌肽(Mw=1442)、氧化型谷胱甘肽(Mw=612)、还原型谷胱甘肽(Mw =307)、牛血清白蛋白(Mw=68000)
认真做事能够把事做对,用心做事才能把事情做好!
4楼2009-09-19 17:28:46
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