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酵母信号肽分泌实验 已有1人参与
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请求实验大佬指导，我最近在做蛋白的信号肽分泌活性的试验。我研究的蛋白经signalP预测有信号肽，大概17个aa序列，然后我连接到PSUC2的载体上转化到酵母感受态YTK12当中，但是转化后将SD-trp培养基上生长的菌落挑到YPRAA培养基上面的时候划线没有菌落长出来，就连阳性对照avr1b都没长，相反酵母菌株YTK12长出来了，我分析了一下会不会是培养基的问题，首先棉子糖的种类是不是有区别，还有就是加的抗霉素A的浓度，但是我们重新做了一批培养基，还是没有长出来，实在是不知道哪里出了问题，还请大佬指导一下。还有就是我选择信号肽长度的时候，并没有按照信号肽预测软件的17个aa所对应的长度，我选了90bp的长度。会不会是这个的问题呢？ @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
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