应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 酵母信号肽分泌实验
31/1返回列表
查看: 1099  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者拇指大姑娘将赠送您 5 个金币

拇指大姑娘

新虫 (初入文坛)

[求助] 酵母信号肽分泌实验 已有1人参与

请求实验大佬指导，我最近在做蛋白的信号肽分泌活性的试验。我研究的蛋白经signalP预测有信号肽，大概17个aa序列，然后我连接到PSUC2的载体上转化到酵母感受态YTK12当中，但是转化后将SD-trp培养基上生长的菌落挑到YPRAA培养基上面的时候划线没有菌落长出来，就连阳性对照avr1b都没长，相反酵母菌株YTK12长出来了，我分析了一下会不会是培养基的问题，首先棉子糖的种类是不是有区别，还有就是加的抗霉素A的浓度，但是我们重新做了一批培养基，还是没有长出来，实在是不知道哪里出了问题，还请大佬指导一下。还有就是我选择信号肽长度的时候，并没有按照信号肽预测软件的17个aa所对应的长度，我选了90bp的长度。会不会是这个的问题呢？

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-11-13 12:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瓢虫ing

银虫 (著名写手)
大佬，方便赠送一点psuc2载体和酵母吗？
赞一下 回复此楼
2楼2021-11-23 18:28:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟王之王

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

酵母这个实验很不靠谱的，建议换成基于可以引起坏死的质外体效应蛋白的方法。或者是直接上最高级的，在烟草里带着信号肽过表达，然后有方法可以把各组分蛋白分开，再WB检测你的目的蛋白是否被分泌出来了。如果一定要用酵母这个方法，就重新换下YTK12菌株再重新做个转化，你阳性都没长我觉得可能是操作问题。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2021-12-17 09:26:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 拇指大姑娘 的主题更新
31/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料考研339求调剂 +3 Karry*^_^* 2026-03-04 3/150 2026-03-06 00:32 by wutongshun
[考博] 26申博-目前4篇SCI一作 +4 chen_2024 2026-03-02 4/200 2026-03-05 22:59 by sicilyl0001
[考研] 376求调剂 +3 王浩然sam 2026-03-04 3/150 2026-03-05 07:48 by bxbo
[考研] 267化工调剂求助 +5 聪少OZ 2026-03-04 5/250 2026-03-04 20:33 by kakakapanpan
[考研] 070300调剂一志愿南京大学化学专业，初试273分，有论文有专利有竞赛，求调剂B区211 +3 82206202 2026-02-28 8/400 2026-03-04 19:24 by 每天只摆一小会
[考研] 一志愿郑州大学，学硕，物理化学， 333求调剂 +5 李魔女斗篷 2026-03-04 5/250 2026-03-04 18:33 by houyaoxu
[考研] 085600 英一数二272求调剂 5+6 vida_a 2026-03-01 47/2350 2026-03-04 13:35 by vida_a
[考研] 347分电子信息专硕求调剂 +3 咕嘟咕嘟1 2026-03-03 3/150 2026-03-04 12:32 by 热情沙漠
[考研] 环境调剂 +8 chenhanheng 2026-03-02 8/400 2026-03-03 22:13 by 刘兵
[考研] 298求调剂一志愿中海洋 +3 lour. 2026-03-03 3/150 2026-03-03 20:41 by gxg2025
[考研] 266材料化工求调剂 +3 哇塞王帅 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:58 by houyaoxu
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +5 Qwertyuop 2026-03-01 5/250 2026-03-03 17:50 by 梅子鸭鸭
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +8 弗格个 2026-02-28 11/550 2026-03-03 14:55 by relum
[考研] 11408，学硕276求调剂 +3 崔wj 2026-03-02 5/250 2026-03-02 22:14 by 255671
[考研] 求调剂 +11 yunziaaaaa 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:59 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 0856材料调剂 +5 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:31 by hypershenger
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 材料学调剂 +10 提神豆沙包 2026-02-28 12/600 2026-03-02 09:26 by 李老师！
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭