应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 植物基因敲低表达，用CRISPR还是用RNAi？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3374  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)

[求助] 植物基因敲低表达，用CRISPR还是用RNAi？ 已有2人参与

最近想要做植物内某个基因的沉默，一直纠结于用Crispr，还是用传统的RNAi技术，我的目的想要看该基因敲低后的相关生理状态，并不一定非要敲除，担心彻底敲除某个基因会引起其他生理反应，而不是我预期的生理现象。因此，想求教各位大神，这两个技术手段的优缺点，针对我的实验目的，有没有大神可以给点建议？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-11-26 14:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 更深的蓝888 at 2020-12-09 20:01:01
CRISPR！现在的杂志影响因子>5的哪个还要RNAi，20年CRISPR入选了诺贝尔奖，更凸显优势，若是选择RNAi审稿人80%的几率会让你用成熟的CRISPR技术做敲除，建议两手准备

还有想问问，CRISPR对于多倍体的植物来说，如果想要拿到纯合的突变体材料，是不是在转化完之后，第一代转基因株系还得进行回交或者自交？一到两代后，才能拿到纯合体，看表型？CRISPR小白，纯好奇问，谢谢！
赞一下 回复此楼
8楼2020-12-12 09:21:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hellohuo: 金币+5, ★★★很有帮助, 感谢您的回答，明白了很多！ 2021-02-20 09:38:45
基于你的描述和研究目的，建议还是做RNAi吧。通常来说，RNAi是降低基因的表达量，即knock-down，但不会完全使基因功能丧失（多数情况下），而CRISPR介导的基因敲除（knock-out），顾名思义，通过在基因编码区引入碱基缺失或插入，造成移码突变或提前终止翻译等，可以实现将基因功能完成丧失。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

hellohuo
2楼2020-11-28 13:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2020-11-28 13:31:27
基于你的描述和研究目的，建议还是做RNAi吧。通常来说，RNAi是降低基因的表达量，即knock-down，但不会完全使基因功能丧失（多数情况下），而CRISPR介导的基因敲除（knock-out），顾名思义，通过在基因编码区引入碱 ...

还想请教一下，基于目前所有关于敲低与敲除的实验，感觉用CRISPR的比较多，而RNAi逐渐变少了，是因为RNAi的技术存在某种问题？还是说大家都朝着新技术CRISPR发展？我觉得彻底敲除可能会造成生理功能的其他连锁变化。因为有些基因对于发育还是挺重要的，直接敲除，可能除了它本身的功能，也连带会出现别的生理变化，这种并不能说明连带的功能就是这个基因本身的功能。我觉得别人肯定也有考虑到这个问题，但是为什么大家还选择CRISPR呢？因为我对这个技术不是很了解，所以有哪些原因是我没想到的，求指教！谢谢！！！
赞一下 回复此楼
3楼2020-12-02 09:14:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellohuo at 2020-12-02 09:14:29
还想请教一下，基于目前所有关于敲低与敲除的实验，感觉用CRISPR的比较多，而RNAi逐渐变少了，是因为RNAi的技术存在某种问题？还是说大家都朝着新技术CRISPR发展？我觉得彻底敲除可能会造成生理功能的其他连锁变化 ...

大家还选择CRISPR进行基因功能研究，，最主要的还是该技术可以实现基因敲除，更确定地是突变体材料的定制，理论上可以实现任意位点的核苷酸序列的改变（编辑），比如特定的编码区、结构域、顺势作用元件、内含子等。其次，CRISPR技术获得材料最后是可以不含外源T-DNA的，意味着在生产上应用的潜力加大，同时更重要的是可以在此基础上再次进行其他基因的敲除，实现多基因敲除（当合理设计携带多个sgRNA也能轻易地进行多基因敲除）。由于CRIPSR的高特异性，对于相似度极高的同源基因也能很好地实现靶基因的敲除。
选择CRISPR还是RNAi，关键取决于各自的试验内容及目的吧，毕竟这俩只是单纯的技术而已，各有有缺，合理使用即可。
你之前有相关的实验数据表明该基因敲除对发育有严重影响吗？
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

hellohuo hellohuo
4楼2020-12-02 12:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +5 PolarBear11 2026-03-26 5/250 2026-03-26 23:59 by 运气yunqi
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +7 NIFFFfff 2026-03-20 7/350 2026-03-26 20:45 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +6 晨昏线与星海 2026-03-20 6/300 2026-03-26 19:20 by macy2011
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭