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C18色谱柱可能被蛋白质污染了，常规冲柱方法都没有用该咋办 已有2人参与
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前段时间在做代谢实验，由于普通的甲醇乙腈变性蛋白质使我的目标化合物无法检测到，于是参考文献尝试少量甲酸变性，结果最近柱压升的厉害，虽然本来也很高了。色谱柱为ACE excel3 C18-AR，目前初始95：5水乙腈，0.6流速柱压240bar+。这个条件是更换了预柱柱心，液相脱气阀的一个柱芯后的柱压。 尝试了几种冲洗方法： 1、高水相低流速正冲； 2、纯甲醇低流速正冲； 3、咨询技术支持后90：10乙腈水，低流速逐渐升高反冲； 4、（技术支持）85：15异丙醇水低流速反冲。 目前看效果都不明显。 试了这么多办法，很多不得不用的办法都用上了还是没效果，目前还是觉得最有可能的污染物是蛋白质，不过不能确定污染物是否只在筛板还是已经进到柱头里了，非常绝望，求助一下各位大神，还有什么除了换柱子的其他路子再拯救一下，谢谢大家了  |
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谢谢@柳絮虫 和@lifucheng两个老师，用0.1%的tfa溶液低流速冲柱子以后柱压一段时间内有下降，但是柱压仍然处于偏高状态，最后卸下筛板超声，把柱头填料刮去一点点后柱压基本恢复，比之前略高一点。重新测的代谢前的样品，出峰时间大体一致，柱效貌似更高了，谢谢两位老师 发自小木虫Android客户端 |
7楼2020-04-14 16:10:25
