应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 如何选择内参抗体
181/1返回列表
查看: 2712  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shishui66

铜虫 (小有名气)

[交流] 如何选择内参抗体

本人准备做WB实验，要做三个抗体，一个是细胞核蛋白，一个是细胞质蛋白，一个是细胞膜蛋白，可以用同一个内参蛋白β-actin吗？哪家公司的内参蛋白抗体比较好用？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

菁华浮梦77

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2019-11-19 15:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

菁华浮梦77

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
选择内参要考虑目的蛋白分子量，通常要保证目的蛋白和内参蛋白分子相差5kd以上，比如检测目的蛋白分子量45kd，就不适宜选择β-actin（42kd）作为内参，可以考虑GAPDH(36kd)。
赞一下(4人) 回复此楼
2楼2019-11-19 16:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13297913532

新虫 (正式写手)
★
shishui66(金币+1): 谢谢参与
三种不同亚定位的蛋白需要用到三种不同的内参

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2019-11-21 21:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ELISA_小雷

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 菁华浮梦77 at 2019-11-19 16:04:16
选择内参要考虑目的蛋白分子量，通常要保证目的蛋白和内参蛋白分子相差5kd以上，比如检测目的蛋白分子量45kd，就不适宜选择β-actin（42kd）作为内参，可以考虑GAPDH(36kd)。

感谢楼上的提醒，差点忘记考虑分子量问题。
赞一下 回复此楼
3楼2019-11-19 16:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13297913532

新虫 (正式写手)
建议如下：细胞核蛋白一般有两种选择：常用的为Histone-H3,组蛋白Histone H3.1由于是染色体的组成型表达组分，表达比较稳定，经常被作为最广泛的核内参使用。目标蛋白15kd左右，。另外一种是增殖细胞核抗原（PCNA），PCNA即增殖细胞核抗原，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名，以后的研究发现PCNA与细胞DNA合成关系密切，在细胞增殖的启动上起重要作用，是反映细胞增殖状态的良好指标。在细胞核内合成，并存在于细胞核内，其由261个氨基酸组成，分子量为36KD。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-11-21 21:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13297913532

新虫 (正式写手)
膜蛋白选择Na/k泵通道蛋白（Na+/K+-ATPase），Na+/K+-ATPase即Na+/K+-ATP酶或Na+/K+-ATP泵，它会使细胞外的Na+浓度高于细胞内，当Na+顺着浓度差进入细胞时，会经由本体蛋白质的运载体将不易通过细胞膜的物质以共同运输的方式带入细胞。其由1023个氨基酸组成，分子量为113KD。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2019-11-21 21:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13297913532

新虫 (正式写手)
细胞质蛋白有多种可以选择,GAPDH 36KDa，肌动蛋白（β-Actin）42 kDa，α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa，其实际检测条带均在55kDa左右。β-tubulin的蛋白水平通常不会发生改变。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2019-11-21 21:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13297913532

新虫 (正式写手)
如果实验中有什么其他的问题，可以加这个微信，包括蛋白，抗体的选择

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2019-11-21 21:16:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shishui66

铜虫 (小有名气)
感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
11楼2019-11-22 09:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sourcecode

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
12楼2019-11-22 09:49:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tzynew4楼
2019-11-19 16:33   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
miaojiabing5楼
2019-11-20 08:09   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
nono200913楼
2019-11-22 15:38   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
·
BiotageAB14楼
2019-11-22 20:09   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
sz_kebaoyuan15楼
2019-11-22 21:06   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
psylhh16楼
2019-11-22 21:18   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
醉酒客17楼
2019-11-23 10:23   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
Fpbear18楼
2019-12-12 08:26   回复  
shishui66(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 shishui66 的主题更新
181/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭