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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 如何选择内参抗体
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shishui66

铜虫 (小有名气)

[交流] 如何选择内参抗体

本人准备做WB实验，要做三个抗体，一个是细胞核蛋白，一个是细胞质蛋白，一个是细胞膜蛋白，可以用同一个内参蛋白β-actin吗？哪家公司的内参蛋白抗体比较好用？
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菁华浮梦77

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1楼 2019-11-19 15:51:22
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13297913532

新虫 (正式写手)
膜蛋白选择Na/k泵通道蛋白（Na+/K+-ATPase），Na+/K+-ATPase即Na+/K+-ATP酶或Na+/K+-ATP泵，它会使细胞外的Na+浓度高于细胞内，当Na+顺着浓度差进入细胞时，会经由本体蛋白质的运载体将不易通过细胞膜的物质以共同运输的方式带入细胞。其由1023个氨基酸组成，分子量为113KD。

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8楼2019-11-21 21:08:40
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菁华浮梦77

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
选择内参要考虑目的蛋白分子量，通常要保证目的蛋白和内参蛋白分子相差5kd以上，比如检测目的蛋白分子量45kd，就不适宜选择β-actin（42kd）作为内参，可以考虑GAPDH(36kd)。
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2楼2019-11-19 16:04:16
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ELISA_小雷

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 菁华浮梦77 at 2019-11-19 16:04:16
选择内参要考虑目的蛋白分子量，通常要保证目的蛋白和内参蛋白分子相差5kd以上，比如检测目的蛋白分子量45kd，就不适宜选择β-actin（42kd）作为内参，可以考虑GAPDH(36kd)。

感谢楼上的提醒，差点忘记考虑分子量问题。
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3楼2019-11-19 16:12:58
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13297913532

新虫 (正式写手)
★
shishui66(金币+1): 谢谢参与
三种不同亚定位的蛋白需要用到三种不同的内参

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6楼2019-11-21 21:06:35
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