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米饭陈

新虫 (小有名气)

[求助] DNA胶回收问题 已有1人参与

DNA片段通过pcr扩增后,进行跑胶、切胶回收。跑胶染色后有很亮的条带,但是胶回收后什么也没有。(已经换了不同的胶回收试剂盒做了,结果一样,没有回收到任何东西。回收加入的溶剂量很低,可以排除是浓度过低的问题)

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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Bio- WJH

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:24:25
扩增体系多少,我们如果要胶回收一般都是高于50ul

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2楼2019-06-11 20:25:44
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-06-12 22:24:35
为什么要胶回收呢?PCR扩增有杂带吗?如果没有,直接用PCR产物回收试剂盒回收就行。你最好把你的电泳图传上来。胶回收损失挺大的,你可以多做几个反应,混合到一起再做胶回收。
3楼2019-06-12 10:38:15
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米饭陈

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Bio- WJH at 2019-06-11 20:25:44
扩增体系多少,我们如果要胶回收一般都是高于50ul

扩增体系有400ul

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4楼2019-06-14 11:59:33
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米饭陈

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-06-12 10:38:15
为什么要胶回收呢?PCR扩增有杂带吗?如果没有,直接用PCR产物回收试剂盒回收就行。你最好把你的电泳图传上来。胶回收损失挺大的,你可以多做几个反应,混合到一起再做胶回收。

Pcr扩增无杂带,那是epcr扩增完后,直接用清洁试剂盒吗?

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5楼2019-06-14 12:01:29
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 米饭陈 at 2019-06-14 12:01:29
Pcr扩增无杂带,那是epcr扩增完后,直接用清洁试剂盒吗?
...

ePCR是什么PCR?没有杂带直接用PCR产物回收试剂盒(国产的效果就很OK,基本国内的试剂厂商都有,天根,全式金等)回收就行。
6楼2019-06-14 13:49:54
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a112233a

新虫 (小有名气)

如果确定pcr后目的基因很纯,可以试试核酸共沉一点都不会浪费,做好再跑个胶验证一下就行了

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7楼2019-06-17 23:52:45
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