24小时热门版块排行榜    

查看: 2023  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)

[求助] 电泳拖尾 已有2人参与

用MixTaq酶PCR,跑电泳没问题,有目标产物,用高保真酶PCR后,50uL全部电泳,准备胶回收纯化DNA,可是电泳完了,产物严重拖尾,没有清晰的目的条带,请问这是怎么回事?请求大神解答@飞约疯人院@biostar2009@wizardfan@youlinglyw
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by macgray1 at 2019-04-08 16:52:19
高保真酶的扩增效率是不如Taq酶的,楼主估计需要重新优化下反应条件了,如果还不行,就不能用高保真酶扩了

嗯嗯,正在用高保真酶优化反应条件了

发自小木虫IOS客户端
7楼2019-04-09 09:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

KM石头

金虫 (正式写手)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-04-09 22:04:02
给楼主一些建议吧,不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系,高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

发自小木虫Android客户端
2楼2019-04-08 00:25:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by KM石头 at 2019-04-08 00:25:25
给楼主一些建议吧,不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系,高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

谢谢答复,电泳前已经更换了TAE,退火温度已经65度了,现在换了一种高保真酶在做,希望能做出来吧

发自小木虫IOS客户端
3楼2019-04-08 13:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KM石头

金虫 (正式写手)

楼主用的是哪家的高保真酶,退火温度好高啊,我用takara的高保真酶,一般是55度,最高56,57度

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2019-04-08 15:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天大化工专调剂总分338 +3 蔡大美女 2026-03-08 3/150 2026-03-14 03:12 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工材料求调剂(有希望2吗?) +3 mysdl 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:53 by JourneyLucky
[考研] 求调剂! +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 306求调剂 +4 唐薏薏 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010,总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+4 NSFC2026我来了 2026-03-10 11/550 2026-03-12 13:13 by NSFC2026我来了
信息提示
请填处理意见