应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳拖尾
51/1返回列表
查看: 2022  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)

[求助] 电泳拖尾 已有2人参与

用MixTaq酶PCR，跑电泳没问题,有目标产物，用高保真酶PCR后，50uL全部电泳，准备胶回收纯化DNA，可是电泳完了，产物严重拖尾，没有清晰的目的条带，请问这是怎么回事？请求大神解答@飞约疯人院@biostar2009@wizardfan@youlinglyw
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-04-07 19:24:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KM石头

金虫 (正式写手)
楼主用的是哪家的高保真酶，退火温度好高啊，我用takara的高保真酶，一般是55度，最高56，57度

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Misterboy
4楼2019-04-08 15:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

KM石头

金虫 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-04-09 22:04:02
给楼主一些建议吧，不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系，高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2019-04-08 00:25:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by KM石头 at 2019-04-08 00:25:25
给楼主一些建议吧，不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系，高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

谢谢答复，电泳前已经更换了TAE，退火温度已经65度了，现在换了一种高保真酶在做，希望能做出来吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2019-04-08 13:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

macgray1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-09 22:04:31
高保真酶的扩增效率是不如Taq酶的，楼主估计需要重新优化下反应条件了，如果还不行，就不能用高保真酶扩了
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Misterboy
5楼2019-04-08 16:52:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +5 困于星晨 2026-03-12 7/350 2026-03-12 22:47 by 困于星晨
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-12 7/350 2026-03-12 20:31 by peike
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +7 苏打水7777 2026-03-11 9/450 2026-03-12 19:45 by 情长不过时光
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +5 小刘快快上岸 2026-03-11 5/250 2026-03-12 15:53 by lijinzzc
[考研] 302求调剂 +4 负心者当诛 2026-03-11 4/200 2026-03-12 15:03 by 每天只摆一小会
[考研] 0856化工原理 +5 z2839474511 2026-03-10 5/250 2026-03-11 19:46 by peike
[考研] 288求调剂 +13 王晓阳- 2026-03-09 18/900 2026-03-11 14:01 by Linda Hu
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 6/300 2026-03-11 12:30 by xujiaoszu
[考研] 312求调剂 +5 陌宸希 2026-03-10 5/250 2026-03-11 07:18 by macy2011
[基金申请] PDF在线压缩软件 10+3 haxia 2026-03-08 4/200 2026-03-10 13:44 by lfy8008
[考研] 调剂的同学，走过路过，不要错过 +11 likeihood 2026-03-06 16/800 2026-03-10 11:38 by Djdjj12
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +4 热爱生活ing 2026-03-09 4/200 2026-03-10 08:25 by Linda Hu
[基金申请] 面上项目还需要AI说明吗？ +3 liyundong 2026-03-08 3/150 2026-03-09 22:30 by kingkocxr
[考研] 0703化学求调剂 +4 很老实人 2026-03-09 4/200 2026-03-09 13:38 by macy2011
[考研] 求0856调剂 +5 小力气珂珂 2026-03-08 5/250 2026-03-09 06:42 by houyaoxu
[考研] 考研求调剂，工科，总分304 +4 矮子不想长高了 2026-03-08 7/350 2026-03-08 22:21 by 小木虫tim
[考研] 288求调剂（0703）一志愿东北大学 +5 好好- 2026-03-07 5/250 2026-03-08 18:22 by zzpnuli111
[考研] 301求调剂 +5 一二LV 2026-03-07 5/250 2026-03-07 22:20 by 18137688336
[考研] 第一志愿上海大学，专业化学工程与技术，总分288，求调剂 +3 1829197082 2026-03-07 3/150 2026-03-07 19:14 by houyaoxu
[考研] 一志愿211 085600 280数二英二求调剂 +3 月山斜 2026-03-06 3/150 2026-03-07 18:56 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭