应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳拖尾
51/1返回列表
查看: 2010  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)

[求助] 电泳拖尾 已有2人参与

用MixTaq酶PCR，跑电泳没问题,有目标产物，用高保真酶PCR后，50uL全部电泳，准备胶回收纯化DNA，可是电泳完了，产物严重拖尾，没有清晰的目的条带，请问这是怎么回事？请求大神解答@飞约疯人院@biostar2009@wizardfan@youlinglyw
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-04-07 19:24:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Misterboy

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by KM石头 at 2019-04-08 00:25:25
给楼主一些建议吧，不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系，高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

谢谢答复，电泳前已经更换了TAE，退火温度已经65度了，现在换了一种高保真酶在做，希望能做出来吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2019-04-08 13:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

KM石头

金虫 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-04-09 22:04:02
给楼主一些建议吧，不敢说一定能解决问题。1.更换电泳液 2.调整PCR体系，高保真酶模板加多了可能出现类似情况 3.可以考虑提高一下退火温度

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2019-04-08 00:25:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KM石头

金虫 (正式写手)
楼主用的是哪家的高保真酶，退火温度好高啊，我用takara的高保真酶，一般是55度，最高56，57度

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Misterboy
4楼2019-04-08 15:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

macgray1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-09 22:04:31
高保真酶的扩增效率是不如Taq酶的，楼主估计需要重新优化下反应条件了，如果还不行，就不能用高保真酶扩了
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Misterboy
5楼2019-04-08 16:52:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿苏大材料工程专硕293求调剂 +4 钢铁大炮 2026-03-04 4/200 2026-03-07 23:16 by ms629
[考研] 322分 085600求调剂，有互联网+国金及主持省级大创经历 +4 熊境喆 2026-03-05 4/200 2026-03-07 22:04 by 星空星月
[考研] 材料325求调剂 30+6 mariusuki 2026-03-02 12/600 2026-03-07 20:12 by xindong
[考研] 材料专硕323求调剂 +5 李白26 2026-03-07 5/250 2026-03-07 16:46 by njzyff
[考研] 304求调剂 +4 52hz~~ 2026-03-05 5/250 2026-03-07 15:47 by lature00
[考研] 085701环境工程295求调剂，一志愿A区211 +7 等春来， 2026-03-06 8/400 2026-03-06 22:04 by 星空星月
[考研] 哈尔滨理工大学2026年研究生调剂，材料科学与化学工程学院研究生调剂 +3 xinliu866 2026-03-06 3/150 2026-03-06 19:42 by 祁东原神
[考研] 材料专硕290求调剂 +8 杰尼龟aaa 2026-03-04 8/400 2026-03-06 16:06 by @飒飒飒飒
[考研] 不限学校专业的调剂同学看过来 +5 啊摆啊摆 2026-03-05 9/450 2026-03-06 12:06 by 啊摆啊摆
[考研] 化工282求调剂一志愿211 +5 NA0912 2026-03-05 6/300 2026-03-05 20:10 by 2735147993
[考研] 283求调剂 +10 鹿沫笙 2026-03-02 11/550 2026-03-05 13:12 by ZHANGTDK
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +6 Doma 2026-03-01 10/500 2026-03-05 10:40 by ms629
[考研] 320材料与化工，求调剂 +6 鹤遨予卿 2026-03-04 8/400 2026-03-04 20:47 by wutongshun
[考研] 0855机械工程324求调剂 +3 郑SK 2026-03-02 7/350 2026-03-04 17:24 by congmingdou
[考研] 能动297求调剂，本科川大 +4 邵11 2026-03-04 4/200 2026-03-04 15:29 by lylylyheart
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+8 ，！？ 2026-03-02 10/500 2026-03-03 12:01 by EBSD
[考研] 288求调剂 +3 少71.8 2026-03-02 5/250 2026-03-03 06:01 by tgxtgxtgx9
[考研] 材料工程274求调剂 +5 Lilithan 2026-03-01 5/250 2026-03-02 19:39 by caszguilin
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭