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慢病毒转染法制作稳定细胞株 已有3人参与
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您好,我最近在做病毒转染相关的实验,是将一些细胞因子(如,人的ceacam,CD4,CD38,CD47等)通过慢病毒系统转染293T,使细胞因子表达在293T细胞的表面,其它都很顺利拿到了单克隆,并且验证正确,只有ceacam做了几次都没拿到正确的克隆,减小药筛浓度也没有用,加药就死的差不多了,幸免活下来的也是检测阴性的,我思考到下面几个原因,但是又都有疑惑,请大神帮我分析一下!非常感谢! 1 基因本身没有转进去,但 293T本身并不是很难转染的细胞,并且重复了几次了 2 基因转进去了,但是表达产物会使细胞死亡 ,这种情况有什么样的思路可以解决 3 基因表达了,但是没有到细胞表面,所以检测不到,呈现阴性结果,可是与它几个细胞因子一样,我加了同样的信号肽,为什么其他的出来了,困惑 |
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| 是不是你的这个在进行病毒包装的时候没包装好 |
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灰色风暴
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bonnieqian