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安静的位置i金虫 (小有名气)
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XhoI 单酶切，再连接，为什么都是假阳性？
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急！载体和目的片段都用XhoI单酶切后，再去磷酸化，再与目的片段连接，最后转化后长出50个克隆，结果都是假阳性，为什么啊？ 酶切体系：XhoI：2uL（Takara） 质粒：10uL buffer:4uL ddH2O:24uL 37℃ 酶切3h 去磷酸化：SAP：0.5uL（Promega） buffer:3uL ddH2O:7uL 质粒酶切回收：20uL 37℃ 水浴15min 再65℃水浴15min，产物纯化回收 |
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