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安静的位置i金虫 (小有名气)
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XhoI 单酶切,再连接,为什么都是假阳性?
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急!载体和目的片段都用XhoI单酶切后,再去磷酸化,再与目的片段连接,最后转化后长出50个克隆,结果都是假阳性,为什么啊? 酶切体系:XhoI:2uL(Takara) 质粒:10uL buffer:4uL ddH2O:24uL 37℃ 酶切3h 去磷酸化:SAP:0.5uL(Promega) buffer:3uL ddH2O:7uL 质粒酶切回收:20uL 37℃ 水浴15min 再65℃水浴15min,产物纯化回收 |
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6楼2009-05-07 15:24:04
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2楼2009-05-07 13:55:09
zhangqshijf2003
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3楼2009-05-07 14:04:15
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