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pc1453

金虫 (小有名气)

[求助] 原核表达如何确定有表达 已有3人参与

原核表达过程中已经测序正确了,预试验的胶图上预测蛋白大小处没有明显条带,这时该如何判断是否有表达呢,又该如何确定表达的位置以及实际的蛋白大小呢
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陈磊fight

银虫 (小有名气)

建议带一个westernblot,如果确定质粒转化进去了,有标签WB检测能看出信号就一定表达了,否则不然只能说明该蛋白确实表达不了。其次可以优化培养基,诱导条件等参数来提高表达量,希望对你有帮助

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16楼2019-09-21 10:20:23
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

2楼2019-01-21 10:49:19
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pc1453

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2019-01-21 10:49:19
那就是没有了

测序也正确,确定带有目的基因的质粒也转化进去了,怎么会没有表达呢
3楼2019-01-21 13:19:33
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melyliang

新虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-21 22:46:11
有标签的话可以做个western

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4楼2019-01-21 17:01:21
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