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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大肠杆菌转化，有斑，无阳性
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新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌转化，有斑，无阳性 已有1人参与

为什么我做的大肠杆菌转化，斑长得很漂亮，就是没阳性

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1楼 2018-04-08 11:48:16
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wenzi6337

木虫 (著名写手)
空载体，载体自连？

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2楼2018-04-08 12:53:20
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
要不要丢给我们呀~~~
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3楼2018-04-08 17:04:59
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diaomou

新虫 (小有名气)
我做TA连接从来没成功过，做粘性末端连接，重组都好好的

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4楼2018-04-09 12:44:40
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一万头

新虫 (初入文坛)
我也遇到过这种问题，换载体之后就好一点了，

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5楼2018-04-09 15:29:32
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1152644551

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一万头 at 2018-04-09 15:29:32
我也遇到过这种问题，换载体之后就好一点了，

意思是感受态不行？

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6楼2018-04-09 17:54:35
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1152644551

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wenzi6337 at 2018-04-08 12:53:20
空载体，载体自连？

对的，空载体，就是把质粒导入感受态

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7楼2018-04-09 17:55:41
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keyangbin

铜虫 (小有名气)
不应该呀！载体质转应该是最简单成功率最高的，如果感受态细胞正常，筛选抗性正常的话，应该是一转一个准的。当然如果你所用的细胞本身就带有和你质转质粒同一个抗性的话就麻烦一点。可以二次筛选，也应该可以的。具体要看你的具体情况啦

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8楼2018-04-09 18:11:13
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18270879372

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前也出现过 后来才反应过来是做pcr时忘了加A尾
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9楼2018-04-09 20:53:09
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aaabndj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 18270879372 at 2018-04-09 20:53:09
我之前也出现过 后来才反应过来是做pcr时忘了加A尾

什么是A尾啊，我是按照师姐给的体系加的，最后也是这种效果

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10楼2023-08-06 10:32:08
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