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fbipolyu

新虫 (初入文坛)

[交流] 纤维素酶与胰蛋白酶的使用问题,重赏,骗人者勿进 已有1人参与

我最近做了个酶催化降解实验:植物细胞粘附在纳米孔氧化铝基片上,考虑它与氧化铝之间粘附是靠纤连蛋白之类的生物分子作用。试用纤维素酶(粉末制成溶液,pH5-6,温度T=40-50)分解细胞壁纤维素,以便研究在基片上留下的蛋白质组成。结果,冻干后的样品,刀刮后剩下一层绿色细胞壁,就是降解不掉,气死人了。光学显微镜下,看到处理后的基片,残留细胞的绿色是消失了,不过很明显的一大块残留物还在那里(只是颜色变黑了)。难道是铝离子使纤维素酶失活了?  

另外试用胰蛋白酶标准溶液(sigma),把粘附在氧化铝基片上的植物细胞洗脱(40度,pH=7),结果晃了好几天,就是不见脱落。郁闷。是不是铝离子又让胰蛋白酶失活了?  

换用硅片做基体,就能解决以上问题吗?我不是学生物出身。是搞材料的。 烦请各位详解。
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qhlhx22


fbipolyu(金币+1,VIP+0):thanks 3-31 16:23
调高pH值和温度
2楼2009-03-28 14:11:12
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刃天青

木虫 (正式写手)


fbipolyu(金币+1,VIP+0):谢谢 3-31 16:25
有的文章中报道了,铁离子,钙离子,锰离子,锌离子对纤维素酶有抑制作用
没有希望的日子要向往光明,在绝望中寻找希望,在失意中寻求得意,改变自己,挑战人生。
3楼2009-03-28 14:51:02
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秀才ecust

新虫 (初入文坛)

★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与,这个帖子快两年了~! 2011-01-22 11:07:00
纤维素酶的作用是需要一定的温度,一定的pH值,一定的离子浓度,更重要的是一定的配比,内外切酶的协同作用。要把细胞壁除掉光有纤维素酶是不行的,可以偿试半纤维素酶等合用。
4楼2011-01-22 05:16:50
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