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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 波谱分析 » HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗
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Yub508

新虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗

我测得物质在210nm 有最大吸收，水相也试过甲酸 乙酸及缓冲盐 得不到想要的峰形，最后用磷酸二氢钾溶液 （30mM，用磷酸调pH2.5左右），有机相用乙腈，缓冲盐/乙腈比例 35/65，提前混合过 并没有晶体析出，因为知道缓冲盐容易堵塞柱子，测试完会用大比例水相冲一个小时，接着以大比例有机相充一会儿封存柱子；
今天实验室妹子给我说最好不要用磷酸盐缓冲液（但我觉得只能选磷酸盐 ，210nm 甲酸 醋酸缓冲液都不合适），说很有可能用一段就堵塞柱子，想问下大家 如果我按以上操作做测试得话，还是会对色谱柱有不可逆得损害吗？希望指导。
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1楼 2018-03-16 00:53:31
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
48楼: Originally posted by Yub508 at 2018-03-18 21:40:43
谢谢建议，我在I试试低浓度的…三氟乙酸在210nm是不是有强烈吸收呀
还有如果我继续用缓冲盐的话，用后清洗的步骤你有什么建议吗？多谢啦
...

三氟乙酸的吸收算是比较弱的，只要浓度不是很高都问题不大。欧盟药典里面有测银杏酸的方法，就是用的三氟乙酸，波长210nm。
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49楼2018-03-19 12:27:19
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