应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 波谱分析 » HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗
511/2返回列表12下一页
查看: 5137  |  回复: 50
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Yub508

新虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗

我测得物质在210nm 有最大吸收，水相也试过甲酸 乙酸及缓冲盐 得不到想要的峰形，最后用磷酸二氢钾溶液 （30mM，用磷酸调pH2.5左右），有机相用乙腈，缓冲盐/乙腈比例 35/65，提前混合过 并没有晶体析出，因为知道缓冲盐容易堵塞柱子，测试完会用大比例水相冲一个小时，接着以大比例有机相充一会儿封存柱子；
今天实验室妹子给我说最好不要用磷酸盐缓冲液（但我觉得只能选磷酸盐 ，210nm 甲酸 醋酸缓冲液都不合适），说很有可能用一段就堵塞柱子，想问下大家 如果我按以上操作做测试得话，还是会对色谱柱有不可逆得损害吗？希望指导。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2018-03-16 00:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jixfeng

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没问题的，何况预混过滤了。 如梯度到65%，则盐浓度有点高了。  若不是考虑离子强度概念的话，此缓冲液建议磷酸 或者 tfa 即可

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
44楼2018-03-17 05:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyeast

专家顾问 (职业作家)
★
Yub508(金币+3): 谢谢参与
30mM 是比较高了，容易析出晶体。如果能够在10-20mM 得到能接受的峰形会好很多。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
26楼2018-03-16 03:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

psd0714

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
系统压力很大，容易堵

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
36楼2018-03-16 07:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjc115725742

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用完后，用90%水冲3-4个小时！！

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
38楼2018-03-16 07:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingshu

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用前用后洗好没有问题  我们的药物很少不用缓冲盐的

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
39楼2018-03-16 07:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

twm1991

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
觉得没那么严重，用完后冲洗干净就好了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
40楼2018-03-16 08:19:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaiyin1991

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这应该是反相柱吧。。。反相柱也就会怕高比例水或者碱性，你如果怕浓度太高析出的话可以自己做下实验看看30mmPB会不会在40%ACN析出，30mMPB不算浓吧。。。。正能说是正常，不知道楼上说偏高是什么鬼
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Yub508
42楼2018-03-16 21:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xx小小xx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
磷酸盐是常用的液相缓冲盐，使用只要符合规则，不会影响寿命的。最基本的几条就是现配现用、用前过滤、用后清洗、冲洗泵头，做到这些，基本上不会有大问题。
不过你现在这个条件有点问题。pH=2.5的话，磷酸会比磷酸二氢钾多，所以你先加30mM的磷酸二氢钾其实太多了。而且你的乙腈达到65%，算比较高了，盐太高有析出的危险。你可以试一下用10mM的磷酸二氢钾，或者只加磷酸不加磷酸二氢钾，或者改用三氟乙酸。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Yub508
45楼2018-03-17 16:07:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaiyin1991

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
43楼: Originally posted by Yub508 at 2018-03-17 00:05:33
对 反相色谱柱  怕高比例水吗……？因为我每次测试完基本都用90%比例水冲一个多小时
...

我不知道你的柱子是什么品牌的什么系列，如果是普通C18那90比例肯定高了，一般只有一些经过表面经过特殊修饰的C18才会用这么高比例的水或者纯水相
赞一下(1人) 回复此楼
46楼2018-03-17 19:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xx小小xx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
48楼: Originally posted by Yub508 at 2018-03-18 21:40:43
谢谢建议，我在I试试低浓度的…三氟乙酸在210nm是不是有强烈吸收呀
还有如果我继续用缓冲盐的话，用后清洗的步骤你有什么建议吗？多谢啦
...

三氟乙酸的吸收算是比较弱的，只要浓度不是很高都问题不大。欧盟药典里面有测银杏酸的方法，就是用的三氟乙酸，波长210nm。
赞一下(1人) 回复此楼
49楼2018-03-19 12:27:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xx小小xx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
48楼: Originally posted by Yub508 at 2018-03-18 21:40:43
谢谢建议，我在I试试低浓度的…三氟乙酸在210nm是不是有强烈吸收呀
还有如果我继续用缓冲盐的话，用后清洗的步骤你有什么建议吗？多谢啦
...

清洗的步骤，你原来的做法没问题。你注意一下泵头和柱塞杆的清洗，有些仪器是有自动清洗装置的，没有的就有手动清洗，仪器说明书会有讲的。
赞一下(1人) 回复此楼
50楼2018-03-19 12:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xngfvgb178

木虫 (著名写手)
★
Yub508(金币+3): 谢谢参与
::::
回复此楼
15楼2018-03-16 01:44:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxz.1982

至尊木虫 (职业作家)
降低浓度试试

发自小木虫Android客户端
回复此楼
37楼2018-03-16 07:36:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

saowe

木虫 (正式写手)
不会，

发自小木虫Android客户端
回复此楼
41楼2018-03-16 13:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yub508

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
42楼: Originally posted by chaiyin1991 at 2018-03-16 21:14:23
你这应该是反相柱吧。。。反相柱也就会怕高比例水或者碱性，你如果怕浓度太高析出的话可以自己做下实验看看30mmPB会不会在40%ACN析出，30mMPB不算浓吧。。。。正能说是正常，不知道楼上说偏高是什么鬼

对 反相色谱柱  怕高比例水吗……？因为我每次测试完基本都用90%比例水冲一个多小时

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
43楼2018-03-17 00:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱朱白白

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没有多大问题，最高有机相比例65能溶解不会析出来的话

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
47楼2018-03-17 22:00:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yub508

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
45楼: Originally posted by xx小小xx at 2018-03-17 16:07:27
磷酸盐是常用的液相缓冲盐，使用只要符合规则，不会影响寿命的。最基本的几条就是现配现用、用前过滤、用后清洗、冲洗泵头，做到这些，基本上不会有大问题。
不过你现在这个条件有点问题。pH=2.5的话，磷酸会比磷酸 ...

谢谢建议，我在I试试低浓度的…三氟乙酸在210nm是不是有强烈吸收呀
还有如果我继续用缓冲盐的话，用后清洗的步骤你有什么建议吗？多谢啦

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
48楼2018-03-18 21:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
rrfwg272楼
2018-03-16 01:12   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
wkby3273楼
2018-03-16 01:13   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
wvbsg344楼
2018-03-16 01:15   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
mnxvch005楼
2018-03-16 01:19   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
syhorchid6楼
2018-03-16 01:19   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
xrmac857楼
2018-03-16 01:22   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
kmubwh2918楼
2018-03-16 01:23   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
kuhnv0959楼
2018-03-16 01:29   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
qepfk0510楼
2018-03-16 01:36   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
kyrtaac60211楼
2018-03-16 01:40   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
xiaoqiuqiu2012楼
2018-03-16 01:41   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
davsmf4313楼
2018-03-16 01:41   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
kuevk2414楼
2018-03-16 01:43   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
eykeq73216楼
2018-03-16 01:46   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
star_zhang17楼
2018-03-16 02:10   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
fcqbnww9618楼
2018-03-16 02:24   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
xskht49219楼
2018-03-16 02:25   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
avkwaaw04820楼
2018-03-16 02:37   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
yfsdm60521楼
2018-03-16 02:50   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
nxpmrp4622楼
2018-03-16 02:59   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
祝福
猎锨mb23楼
2018-03-16 03:00   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
nzfhm67924楼
2018-03-16 03:12   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
pfin83825楼
2018-03-16 03:24   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
awaqvjy79427楼
2018-03-16 03:51   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
hqhsfyb6728楼
2018-03-16 03:59   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
祝福
qypmrdn91729楼
2018-03-16 04:01   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
aawed9330楼
2018-03-16 04:19   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
ddgdrva2431楼
2018-03-16 04:20   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
haub94632楼
2018-03-16 04:47   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
jwvdyj2233楼
2018-03-16 05:21   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
fsbmfq7034楼
2018-03-16 05:47   回复  
Yub508(金币+3): 谢谢参与
祝福
dyqqbbq38235楼
2018-03-16 05:51   回复  
Yub508(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 Yub508 的主题更新
511/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ufgqpyvpi6 2026-07-18 4/200 2026-07-19 20:23 by mxyes0ckns
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 ufgqpyvpi6 2026-07-18 5/250 2026-07-19 20:19 by mxyes0ckns
[基金申请] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ufgqpyvpi6 2026-07-18 5/250 2026-07-19 20:14 by mxyes0ckns
[基金申请] 面上的水很深 +17 布布和一二 2026-07-18 22/1100 2026-07-19 20:03 by botar
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 ufgqpyvpi6 2026-07-18 5/250 2026-07-19 20:03 by mxyes0ckns
[基金申请] 小木虫没落了，除了祈祷帖子，几乎看不到有价值的帖子 +15 botar 2026-07-14 16/800 2026-07-19 18:23 by wowsunflower
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 bjm2e4yior 2026-07-18 3/150 2026-07-19 16:43 by 0u3sh5hhfi
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ufgqpyvpi6 2026-07-18 6/300 2026-07-19 16:23 by 0u3sh5hhfi
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ufgqpyvpi6 2026-07-18 6/300 2026-07-19 16:03 by 0u3sh5hhfi
[基金申请] 国社科通讯评审 +5 潜水冠军123 2026-07-18 6/300 2026-07-19 12:28 by lfy8008
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +7 luckinging 2026-07-14 11/550 2026-07-17 20:43 by 虫卜1988
[论文投稿] 投英文期刊如何查重 10+5 不知道取什么名� 2026-07-15 6/300 2026-07-17 09:07 by bobvan
[有机交流] 伯胺上甲基求助 100+4 002tmumu 2026-07-14 7/350 2026-07-16 19:47 by 002tmumu
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+5 倪好520 2026-07-13 5/250 2026-07-16 17:24 by 无视军团
[基金申请] 生生命学部会评 +4 wuke100666 2026-07-15 4/200 2026-07-16 00:12 by 啦啦小妮子
[基金申请] H口，面上，时间戳7月7日。 +3 plumage5 2026-07-15 3/150 2026-07-15 21:06 by 6543yes
[基金申请] E口会评 +11 布布和一二 2026-07-13 13/650 2026-07-15 16:34 by Kittylucky
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 40+3 小小书虫c 2026-07-14 9/450 2026-07-15 16:04 by 安静的知了
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[基金申请] 没收到消息，再次陪跑 +3 天空星辰fly 2026-07-14 3/150 2026-07-14 19:14 by 6543yes
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭