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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 波谱分析 » HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗
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Yub508

新虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗

我测得物质在210nm 有最大吸收，水相也试过甲酸 乙酸及缓冲盐 得不到想要的峰形，最后用磷酸二氢钾溶液 （30mM，用磷酸调pH2.5左右），有机相用乙腈，缓冲盐/乙腈比例 35/65，提前混合过 并没有晶体析出，因为知道缓冲盐容易堵塞柱子，测试完会用大比例水相冲一个小时，接着以大比例有机相充一会儿封存柱子；
今天实验室妹子给我说最好不要用磷酸盐缓冲液（但我觉得只能选磷酸盐 ，210nm 甲酸 醋酸缓冲液都不合适），说很有可能用一段就堵塞柱子，想问下大家 如果我按以上操作做测试得话，还是会对色谱柱有不可逆得损害吗？希望指导。
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1楼 2018-03-16 00:53:31
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chaiyin1991

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
43楼: Originally posted by Yub508 at 2018-03-17 00:05:33
对 反相色谱柱  怕高比例水吗……？因为我每次测试完基本都用90%比例水冲一个多小时
...

我不知道你的柱子是什么品牌的什么系列，如果是普通C18那90比例肯定高了，一般只有一些经过表面经过特殊修饰的C18才会用这么高比例的水或者纯水相
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46楼2018-03-17 19:26:59
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