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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 波谱分析 » HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗
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Yub508

新虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流动相用磷酸缓冲液对柱子损坏很大吗

我测得物质在210nm 有最大吸收，水相也试过甲酸 乙酸及缓冲盐 得不到想要的峰形，最后用磷酸二氢钾溶液 （30mM，用磷酸调pH2.5左右），有机相用乙腈，缓冲盐/乙腈比例 35/65，提前混合过 并没有晶体析出，因为知道缓冲盐容易堵塞柱子，测试完会用大比例水相冲一个小时，接着以大比例有机相充一会儿封存柱子；
今天实验室妹子给我说最好不要用磷酸盐缓冲液（但我觉得只能选磷酸盐 ，210nm 甲酸 醋酸缓冲液都不合适），说很有可能用一段就堵塞柱子，想问下大家 如果我按以上操作做测试得话，还是会对色谱柱有不可逆得损害吗？希望指导。
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1楼 2018-03-16 00:53:31
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Yub508

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
45楼: Originally posted by xx小小xx at 2018-03-17 16:07:27
磷酸盐是常用的液相缓冲盐，使用只要符合规则，不会影响寿命的。最基本的几条就是现配现用、用前过滤、用后清洗、冲洗泵头，做到这些，基本上不会有大问题。
不过你现在这个条件有点问题。pH=2.5的话，磷酸会比磷酸 ...

谢谢建议，我在I试试低浓度的…三氟乙酸在210nm是不是有强烈吸收呀
还有如果我继续用缓冲盐的话，用后清洗的步骤你有什么建议吗？多谢啦

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48楼2018-03-18 21:40:43
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