| 查看: 3193 | 回复: 22 | |||
[交流]
求大神解答，为什么我的TA克隆重组一直连不上去已有6人参与
|
我用的载体是PUC19-GFP，目的片段是1300多bp。加A反应体系：dd水 0.3ul，PCR扩增片段 20ul,Buffer 2.5ul,dNTP 2ul.rTaq 0.2ul,反应条件72℃30min。载体骨架和目的片段胶回收纯化之后浓度和纯度都很好，连接体系就是1:2,1:8,1:16都用过，而且也把三种比例放一个板上转化过，都没有成功，一个斑都没有 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有146人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
2楼2018-01-23 03:07:12
hubeigxkkk
新虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 27.5
- 红花: 2
- 帖子: 11
- 在线: 15.2小时
- 虫号: 3906545
- 注册: 2015-06-03
- 专业: 植物生理与生化
3楼2018-01-25 15:42:33
4楼2018-01-29 23:22:58
5楼2018-02-04 20:36:05
6楼2018-02-04 20:43:08
GRUBBY_WU
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 153 (高中生)
- 金币: 6550.9
- 红花: 24
- 帖子: 1233
- 在线: 153.7小时
- 虫号: 7859436
- 注册: 2018-02-01
- 性别: GG
- 专业: 人类遗传学
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-17 12:18:12
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-17 12:18:12
|
PUC19-GFP是T载体吗？T载体一般不都是pXX-T Vector，像pGEM-T、pUC18-T、pMD18-T 我们用takara的pMD™18 -T Vector，云盘是详细的流程，你可以参考下，链接: https://pan.baidu.com/s/1kWYepsb 密码: 8tfa |
7楼2018-02-05 10:49:10
peitaokong
银虫 (小有名气)
- 应助: 70 (初中生)
- 金币: 619.5
- 散金: 12
- 红花: 13
- 帖子: 192
- 在线: 55小时
- 虫号: 1961265
- 注册: 2012-08-29
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
8楼2018-02-05 11:16:27
9楼2018-02-05 11:57:36
10楼2018-02-10 11:30:16