24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3309  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Michael ~

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大神解答,为什么我的TA克隆重组一直连不上去 已有6人参与

我用的载体是PUC19-GFP,目的片段是1300多bp。加A反应体系:dd水 0.3ul,PCR扩增片段 20ul,Buffer 2.5ul,dNTP 2ul.rTaq 0.2ul,反应条件72℃30min。载体骨架和目的片段胶回收纯化之后浓度和纯度都很好,连接体系就是1:2,1:8,1:16都用过,而且也把三种比例放一个板上转化过,都没有成功,一个斑都没有
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hubeigxkkk

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-17 12:17:56
连接比列不是很关键。你的这个是T载体吗?以前TA克隆有问题吗?感受态有问题吗?你描述的也不清楚,中间很多环节都有可能有问题
3楼2018-01-25 15:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化对照做了吗?
抗生素?
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-01-23 03:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

遊俠

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个加A体系。。合适吗?

发自小木虫Android客户端
4楼2018-01-29 23:22:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Michael ~

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2018-01-23 03:07:12
转化对照做了吗?
抗生素?

转化对照没做,抗生素会出什么问题么
5楼2018-02-04 20:36:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 调剂 +3 GK72 2026-03-30 3/150 2026-03-30 18:31 by 啊李999
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +6 真名有冰 2026-03-29 7/350 2026-03-30 16:36 by herarysara
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见