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求大神解答，为什么我的TA克隆重组一直连不上去 已有6人参与
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我用的载体是PUC19-GFP，目的片段是1300多bp。加A反应体系：dd水 0.3ul，PCR扩增片段 20ul,Buffer 2.5ul,dNTP 2ul.rTaq 0.2ul,反应条件72℃30min。载体骨架和目的片段胶回收纯化之后浓度和纯度都很好，连接体系就是1:2,1:8,1:16都用过，而且也把三种比例放一个板上转化过，都没有成功，一个斑都没有 |
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