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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 提完DNA后pcr不出来
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小小于不吃鱼

新虫 (初入文坛)
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提完DNA后pcr不出来
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求助求助，我提完dna后用高保真酶PCR,但是p不出来，我提的dna浓度有300左右的，也有100左右的，跑胶也特别亮，就是p不出来，请问什么原因？

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1楼 2017-10-28 15:21:24
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wareer

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降低模板浓度，最好低于200ng每微升。

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10楼2017-10-28 15:35:20
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luckydog52

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-29 08:42:53
一般是稀释100倍，试试看。高保真酶都敏感，记得是看260/230

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13楼2017-10-28 20:53:45
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183王山山

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物设计的有问题？

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8楼2017-10-28 15:30:13
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小小于不吃鱼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 183王山山 at 2017-10-28 15:30:13
引物设计的有问题？

没有，以前能p出来，用taq酶也能p出来

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9楼2017-10-28 15:34:29
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用slowdown 做一下，有些时候会这样，可以重新设计引物如果换程序不行

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11楼2017-10-28 19:30:04
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酷莱博

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板很少很少都能p出来。退火温度没啥问题。引物没啥问题。最有可能就是酶有问题了。。。

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12楼2017-10-28 20:06:52
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luckydog52

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by luckydog52 at 2017-10-28 20:53:45
一般是稀释100倍，试试看。高保真酶都敏感，记得是看260/230

230高就不行 你拿nano看看

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14楼2017-10-28 20:54:11
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一一ab

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换酶，我一般情况下P不出来就换酶

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15楼2017-10-31 00:21:58
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Triumph10112楼
2017-10-28 15:21   回复  
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pandongzi3楼
2017-10-28 15:22   回复  
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a阿拉灯神丁4楼
2017-10-28 15:22   回复  
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小糊涂虫虫5楼
2017-10-28 15:23   回复  
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甄士隐2076楼
2017-10-28 15:23   回复  
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随堂测验青青7楼
2017-10-28 15:24   回复  
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