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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 目的基因条带太浅怎么回收测序啊啊啊···
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)

[交流] 目的基因条带太浅怎么回收测序啊啊啊···

万能的小木虫大神们：
       请教一下我想用目的基因测序，但是所用菌株里目的基因的序列在NCBI上查不到，我就用了文献里的相关引物进行扩增。做了梯度PCR在基因组里扩出来了，但是条带很浅，无法进行后续的纯化或胶回收，肿么办啊？该从哪方面入手PCR还是合成引物？跪求大神们支招···
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1楼 2017-09-17 14:05:50
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守望者047

金虫 (小有名气)
★
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
直接以产物原液为模板再跑一次PCR

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4楼2017-09-17 15:47:02
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游在水里的鱼

银虫 (小有名气)
★
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
可以不回收，直接用这个当模版，在p一次

发自小木虫IOS客户端
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2楼2017-09-17 14:12:29
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domopal

铁杆木虫 (正式写手)
★
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
记得稀释

发自小木虫Android客户端
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7楼2017-09-17 19:17:40
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 游在水里的鱼 at 2017-09-17 14:12:29
可以不回收，直接用这个当模版，在p一次

我试了，之前做的梯度，在有条带的几个温度里选了一个较好的，取PCR产物1ul为模板又P了一次，结果跑胶出来啥都没有了
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8楼2017-09-17 20:05:28
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wdxmu5楼
2017-09-17 16:50   回复  
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
一 发自小木虫IOS客户端
zhaoyan197811楼
2017-09-17 20:20   回复  
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
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dongmings14楼
2017-09-17 20:46   回复  
婷宝宝2013(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫IOS客户端
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