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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序问题
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序问题 已有5人参与

设计引物做pcr，产物电泳后条带很亮，可是为什么测序总是测不出来，测序结果总是失败？

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1楼 2017-08-24 15:23:54
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18253592055

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 曼陀罗爱上黑夜 at 2017-08-24 20:09:49
纯化我也试过了，电泳条带挺亮的，还是测不出来
...

如果这样的话那就剩下引物的问题，其实你可以连一下t载，然后用载体上的引物测一下，然后blast一下，就知道你p出来的到底是什么了。

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11楼2017-08-24 20:13:27
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bbass533

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:34:23
本帖内容被屏蔽
2楼2017-08-24 15:25:36
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luoyl210

新虫 (著名写手)
送克隆菌去测序会好一些

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3楼2017-08-24 15:37:27
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-08-24 15:25:36
不建议送pcr产物去测序，最好是连接载体再测。不然会出现很多你想不出来的问题

原来是这样啊！可是连载体不会很麻烦吗？什么防止载体自连还有粘性末端什么的

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4楼2017-08-24 15:58:48
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