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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 目的基因和载体为什么连不上？？
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
已领完
目的基因和载体为什么连不上？？
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我的目的基因片段大小是1500bp，之前目的基因p出来是1500，可是连接以后我做菌p，跑出来的条带大概是300bp左右，有没有大神教教我！第一张图是目的基因的条带，第二张图是连接以后做的菌p的。maker大小为5000。

目的基因和载体为什么连不上？？


目的基因和载体为什么连不上？？-1


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1楼 2017-08-07 07:16:50
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1298067895

木虫 (职业作家)
载体有多长？

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8楼2017-08-07 07:20:03
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-08-07 07:20:03
载体有多长？

载体用的是pet28，抽质粒跑出来大小我记得不止300bp

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9楼2017-08-07 07:23:18
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极北小白熊

铁虫 (正式写手)
★
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一点杂带都没有，不好说什么原因。。挑十几个克隆p，排除污染可能，还没有就重连，这玩意分析不出什么。。

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10楼2017-08-07 07:23:59
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1298067895

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你的载体很小的话或者比1500bp长不了多少是连不起来的！

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拂柳飞絮
11楼2017-08-07 07:37:21
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-08-07 07:37:21
如果你的载体很小的话或者比1500bp长不了多少是连不起来的！

哦哦，下次我测下空载大小

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12楼2017-08-07 08:04:32
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-08-07 07:37:21
如果你的载体很小的话或者比1500bp长不了多少是连不起来的！

谢谢

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13楼2017-08-07 08:04:41
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1298067895

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 拂柳飞絮 at 2017-08-07 08:04:32
哦哦，下次我测下空载大小
...

百度一下，不需要做实验验证吧

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14楼2017-08-07 08:44:34
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
插入序列PCR和菌P的引物一样的么？建议测序，估计引物设计有问题，正常不可能吧。
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15楼2017-08-14 08:45:21
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8520586832楼
2017-08-07 07:17   回复  
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幸福冰凝3楼
2017-08-07 07:17   回复  
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hawkfang44楼
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12980678955楼
2017-08-07 07:18   回复  
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cuiyuzhu11956楼
2017-08-07 07:19   回复  
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wyq1767楼
2017-08-07 07:19   回复  
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