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妍研

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相基线不稳 已有4人参与

到20多分钟的时候,黑色那根线的峰不知道为什么就这么上去了,求告知

高效液相基线不稳


高效液相基线不稳-1


@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基线不稳原因:
  ① 柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)
  ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
  ③流通池被污染或有气体
  ④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)
  ⑤流动相配比不当或流速变化
  ⑥柱平衡慢,特别是流动相发生变化时
  ⑦流动相污染、变质或由低品质溶剂配成
  ⑧样品中有强保留的物质(高k’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
  ⑨使用循环溶剂,不提倡。未调整检测器。
  ⑩检测器没有设定在最大吸收波长处。
解决方法
  ①控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器
  ②使用hplc级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用在线脱气或氦气脱气。
  ③用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1n的硝酸。(不要用盐酸)
  ④取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
  ⑤更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
  ⑥用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。使用离子对试剂、缓冲盐更应注意平衡柱。
  ⑦检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及hplc级的溶剂
  ⑧改变分析条件。使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
  ⑨重新设定基线。使用新的流动相。
  ⑩将波长调整至最大吸收波长处。重选检测波长。
及时行乐,人生不留遗憾!
6楼2017-08-04 17:47:20
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普通回帖

妍研

新虫 (初入文坛)

2楼2017-08-04 16:53:33
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knighthan112

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品不纯或者溶剂脏了吧 或者紫外灯异常?多冲洗一段时间看下基线在

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2017-08-04 17:11:21
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妍研

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by knighthan112 at 2017-08-04 17:11:21
样品不纯或者溶剂脏了吧 或者紫外灯异常?多冲洗一段时间看下基线在

跑的样品是滇重楼核苷,我们就是把样品给它超声,离心,然后过滤之后用液相跑样的,样品不纯咋弄

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2017-08-04 17:37:38
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妍研

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 妍研 at 2017-08-04 17:37:38
跑的样品是滇重楼核苷,我们就是把样品给它超声,离心,然后过滤之后用液相跑样的,样品不纯咋弄
...

那个后来跑对照品又是正常的

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5楼2017-08-04 17:42:34
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妍研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-08-04 17:47:20
基线不稳原因:
  ① 柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)
  ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线 ...

多谢

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7楼2017-08-04 17:48:49
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
6楼好全。个人觉得一般出现这种情况,最有可能的就是:1、有强保留物质在你的条件下被洗出来了,可能是你的样品,也可能是以前别人进的样残留的;2、流动相污染;3、色谱柱损坏;4、检测器污染
8楼2017-08-05 11:55:16
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妍研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xxaijwd at 2017-08-05 11:55:16
6楼好全。个人觉得一般出现这种情况,最有可能的就是:1、有强保留物质在你的条件下被洗出来了,可能是你的样品,也可能是以前别人进的样残留的;2、流动相污染;3、色谱柱损坏;4、检测器污染

因为之前做,也会有这种现象,但是没有这么明显,后来越来越明显了,可能是墙保留物质积累在那了

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9楼2017-08-05 21:48:55
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妍研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xxaijwd at 2017-08-05 11:55:16
6楼好全。个人觉得一般出现这种情况,最有可能的就是:1、有强保留物质在你的条件下被洗出来了,可能是你的样品,也可能是以前别人进的样残留的;2、流动相污染;3、色谱柱损坏;4、检测器污染

但是后来跑对照品就不会有这种现象,但是跑样品就会有

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10楼2017-08-05 21:49:54
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