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xzfihjj

新虫 (小有名气)

[求助] 发酵液分离纯化 已有2人参与

导师让做细菌发酵液分离纯化,但是特别黏,超速离心机25000rmp 30min都离心的不太干净,请问我可以离心完带菌体直接冻干吗?要分离的可能是脂肽类或蛋白类,对后续操作有什么影响吗?脂肽类或蛋白有什么好的分离手段吗?新生实验室还没人做分离纯化,感觉有点难受,请大家多多帮助,谢谢,谢谢!

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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
发酵液 → 预处理 → 分离 → 破碎 → 碎片分离 → 初步纯化

粗提取——硫酸铵分级沉淀——透析脱盐——乙醇分级沉淀——离子交换层析
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-22 22:50:19
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xzfihjj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-22 22:50:19
发酵液 → 预处理 → 分离 → 破碎 → 碎片分离 → 初步纯化

粗提取——硫酸铵分级沉淀——透析脱盐——乙醇分级沉淀——离子交换层析

那我带菌体有影响吗

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3楼2017-07-23 00:40:31
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4楼2017-07-23 00:59:00
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476054377

金虫 (著名写手)

我也是做发酵液的分离纯化,,不过是化学成分,我用的是3000转,10分钟就ok。菌体就可以去除。

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5楼2017-07-23 08:35:11
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476054377

金虫 (著名写手)

不过我取的是上清液,沉淀都在底部

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6楼2017-07-23 08:36:10
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落叶凝霜

新虫 (初入文坛)

你是为了得到什么,上清液还是菌丝体?

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7楼2017-08-01 08:54:20
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坊间少年

新虫 (初入文坛)

有些蛋白是水溶性的,你要的物质在哪个相里面

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8楼2017-08-01 19:18:42
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tsleb

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

能不能考虑使用膜分离,
Tobemyself
9楼2021-07-23 14:12:37
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