应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：定量PCR结果无CT值
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
181/2返回列表12下一页
查看: 4227  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qiaoqiao1223

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 求助：定量PCR结果无CT值

昨天跑了一次定量，想做标准曲线，但是出来的结果没有CT值。反应模板是线粒体DNA，引物、反应条件等都是经其他实验室测定、摸索过的。
我们把标准样品梯度稀释，只有浓度最高的样品有CT值，30多。
同时一起跑的几个待测样品，也有的有CT值（30多），有的没有。

这种情况是不是说明我们标准样品的浓度太低了？
下一步调整是需要增加样品浓度？还是增加循环次数时间？还是两个都要？ 或者是因为别的问题？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-07-04 08:42:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yucuiyuan00

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:28
一般荧光定量PCR Ct值30多，说明模板浓度比较低，需要提高模板浓度。PCR结束有扩增曲线的话再跑胶确认下片段大小。循环数可以增加到40。
赞一下(3人) 回复此楼
保持平常心❤
3楼2017-07-04 09:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fano8o9sin

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是模板浓度太低了，一般循环次数设置到40
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2017-07-04 10:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stabilized

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:42
最好先用PCR试试条件，跑电泳确认能P出条带
赞一下(1人) 回复此楼
坚持！
2楼2017-07-04 08:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
样本浓度吧，你有具体的实验扩增曲线图吗

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2017-07-04 11:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贱贱JMe

兑换贵宾

教导主任

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:43:01
没有设置内参吗，简单增加循环次数意义不大，CT过大并不能说明问题
赞一下(1人) 回复此楼
想做一位科研好人
6楼2017-07-04 16:55:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

qiaoqiao1223

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
6楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2017-07-04 16:55:34
没有设置内参吗，简单增加循环次数意义不大，CT过大并不能说明问题

做标准曲线的，好像不用内参吧。。我们没设内参。等明天再换个标准样品，增加循环次数再试一下~
赞一下 回复此楼
7楼2017-07-05 07:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaoqiao1223

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-07-04 08:46:14
最好先用PCR试试条件，跑电泳确认能P出条带

我们打算换个标准样品，增加以下循环次数再试一下~等结果出来了，如果还没有CT值，就再麻烦大家帮忙分析一下~
赞一下 回复此楼
8楼2017-07-05 07:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaoqiao1223

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by yucuiyuan00 at 2017-07-04 09:03:08
一般荧光定量PCR Ct值30多，说明模板浓度比较低，需要提高模板浓度。PCR结束有扩增曲线的话再跑胶确认下片段大小。循环数可以增加到40。

我们打算换个标准样品，增加以下循环次数再试一下~等结果出来了，如果还没有CT值，就再麻烦大家帮忙分析一下~

上次都忘了该跑一次胶看看。下次如果还不行，就跑一次胶~谢谢！
赞一下 回复此楼
9楼2017-07-05 07:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaoqiao1223

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
4楼: Originally posted by fano8o9sin at 2017-07-04 10:12:44
应该是模板浓度太低了，一般循环次数设置到40

我们打算换个标准样品，增加以下循环次数再试一下~等结果出来了，如果还没有CT值，就再麻烦大家帮忙分析一下~
赞一下 回复此楼
10楼2017-07-05 07:32:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qiaoqiao1223 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309分085801求调剂 +6 学员Gtwj7W 2026-03-31 6/300 2026-04-01 00:37 by fmesaito
[考研] 材料科学与工程求调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-29 13/650 2026-03-31 19:50 by Dyhoer
[考研] 308求调剂 +11 墨墨漠 2026-03-25 11/550 2026-03-31 17:54 by 无际的草原
[考研] 江苏苏北高校诚邀调剂同学 +3 zzll406 2026-03-31 3/150 2026-03-31 16:54 by 及时行乐fan
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:35 by hypershenger
[考研] 材料科学与工程调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-30 14/700 2026-03-31 16:28 by hypershenger
[考研] 367求调剂 +7 芋泥啵啵… 2026-03-28 7/350 2026-03-31 14:55 by 不吃魚的貓
[考研] 289求调剂 +3 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-03-31 14:48 by 热情沙漠
[考研] 286求调剂 +5 丢掉懒惰 2026-03-27 8/400 2026-03-31 11:27 by Delta2012
[考研] 南京大学化学调剂 +11 景随风 2026-03-29 16/800 2026-03-31 10:14 by herarysara
[考研] 福建理工大学材料学院先进合金团队招收考研调剂学生 +3 大华金商都 2026-03-30 4/200 2026-03-31 01:04 by 方英俊602
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +13 丹青奶盖 2026-03-26 15/750 2026-03-30 12:35 by fangnagu
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 机械学硕310分，数一英一，一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭