24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4216  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qiaoqiao1223

新虫 (小有名气)

[求助] 求助:定量PCR结果无CT值

昨天跑了一次定量,想做标准曲线,但是出来的结果没有CT值。反应模板是线粒体DNA,引物、反应条件等都是经其他实验室测定、摸索过的。
我们把标准样品梯度稀释,只有浓度最高的样品有CT值,30多。
同时一起跑的几个待测样品,也有的有CT值(30多),有的没有。

这种情况是不是说明我们标准样品的浓度太低了?
下一步调整是需要增加样品浓度?还是增加循环次数时间?还是两个都要? 或者是因为别的问题?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaoqiao1223

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yucuiyuan00 at 2017-07-04 09:03:08
一般荧光定量PCR Ct值30多,说明模板浓度比较低,需要提高模板浓度。PCR结束有扩增曲线的话再跑胶确认下片段大小。循环数可以增加到40。

我们打算换个标准样品,增加以下循环次数再试一下~等结果出来了,如果还没有CT值,就再麻烦大家帮忙分析一下~

上次都忘了该跑一次胶看看。下次如果还不行,就跑一次胶~谢谢!
9楼2017-07-05 07:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:42
最好先用PCR试试条件,跑电泳确认能P出条带
坚持!
2楼2017-07-04 08:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucuiyuan00

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:28
一般荧光定量PCR Ct值30多,说明模板浓度比较低,需要提高模板浓度。PCR结束有扩增曲线的话再跑胶确认下片段大小。循环数可以增加到40。
保持平常心❤
3楼2017-07-04 09:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fano8o9sin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是模板浓度太低了,一般循环次数设置到40
4楼2017-07-04 10:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +13 minht 2026-03-29 13/650 2026-03-31 17:47 by 544594351
[考研] 调剂 +4 好好读书。 2026-03-28 5/250 2026-03-31 16:29 by 我就是我ok
[考研] 调剂申请 +6 张张张张zy 2026-03-31 6/300 2026-03-31 14:20 by 记事本2026
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +17 荷包蛋hyj 2026-03-26 17/850 2026-03-31 12:41 by jp9609
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:56 by jp9609
[考研] 求调剂 +4 研s. 2026-03-25 4/200 2026-03-31 10:05 by fmesaito
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 求调剂 +10 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 10/500 2026-03-30 18:34 by 544594351
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-28 6/300 2026-03-30 10:29 by Evan_Liu
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 0703化学338求调剂! +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
信息提示
请填处理意见