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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：定量PCR结果无CT值
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qiaoqiao1223

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 求助：定量PCR结果无CT值

昨天跑了一次定量，想做标准曲线，但是出来的结果没有CT值。反应模板是线粒体DNA，引物、反应条件等都是经其他实验室测定、摸索过的。
我们把标准样品梯度稀释，只有浓度最高的样品有CT值，30多。
同时一起跑的几个待测样品，也有的有CT值（30多），有的没有。

这种情况是不是说明我们标准样品的浓度太低了？
下一步调整是需要增加样品浓度？还是增加循环次数时间？还是两个都要？ 或者是因为别的问题？
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1楼 2017-07-04 08:42:29
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qiaoqiao1223

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-07-04 08:46:14
最好先用PCR试试条件，跑电泳确认能P出条带

我们打算换个标准样品，增加以下循环次数再试一下~等结果出来了，如果还没有CT值，就再麻烦大家帮忙分析一下~
赞一下 回复此楼
8楼2017-07-05 07:29:42
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stabilized

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:42
最好先用PCR试试条件，跑电泳确认能P出条带
赞一下(1人) 回复此楼
坚持！
2楼2017-07-04 08:46:14
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yucuiyuan00

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-05 07:42:28
一般荧光定量PCR Ct值30多，说明模板浓度比较低，需要提高模板浓度。PCR结束有扩增曲线的话再跑胶确认下片段大小。循环数可以增加到40。
赞一下(3人) 回复此楼
保持平常心❤
3楼2017-07-04 09:03:08
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fano8o9sin

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是模板浓度太低了，一般循环次数设置到40
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4楼2017-07-04 10:12:44
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