应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 易错PCR构建基因文库
41/1返回列表
查看: 1191  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tong929319

新虫 (初入文坛)

[求助] 易错PCR构建基因文库 已有2人参与

文库构建了快一个月了还是没进展，求助求助～～～一开始使用infusion的方法将易错PCR产物与表达载体直接连接，转化后也就有30个单菌落，阳性克隆还特别少。于是呢我就想将易错PCR产物跟T载先连后续酶切再连表达载体了，但我连上T载提质粒(提的全板的混合质粒)后酶切切不开了。。。大家是怎么构建质粒文库的呀，求大神指点下

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-06-16 19:33:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子非鱼ys

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近也在做文库，先易错PCR，纯化后进行Mega WHOP 大引物进行全质粒PCR（步骤可以看看博士论文），消化后转化，我的问题出在想把消化产物直接转BL21（DE3），但是一直转不进去。看文献都是直接电转BL21，我的产物转DH5a是没有问题的
赞一下 回复此楼
2楼2017-07-03 16:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaodada123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主文库构建的问题解决了吗？我也是卡在这已经几个月了？求教~谢谢~
赞一下 回复此楼
3楼2017-08-17 11:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)
我在苏州泓迅做的，挺好挺快
赞一下 回复此楼
冷风过心变热
4楼2017-08-17 13:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tong929319 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭