应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 易错PCR构建基因文库
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 1149  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tong929319

新虫 (初入文坛)

[求助] 易错PCR构建基因文库 已有2人参与

文库构建了快一个月了还是没进展，求助求助～～～一开始使用infusion的方法将易错PCR产物与表达载体直接连接，转化后也就有30个单菌落，阳性克隆还特别少。于是呢我就想将易错PCR产物跟T载先连后续酶切再连表达载体了，但我连上T载提质粒(提的全板的混合质粒)后酶切切不开了。。。大家是怎么构建质粒文库的呀，求大神指点下

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-06-16 19:33:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子非鱼ys

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近也在做文库，先易错PCR，纯化后进行Mega WHOP 大引物进行全质粒PCR（步骤可以看看博士论文），消化后转化，我的问题出在想把消化产物直接转BL21（DE3），但是一直转不进去。看文献都是直接电转BL21，我的产物转DH5a是没有问题的
赞一下 回复此楼
2楼2017-07-03 16:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaodada123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主文库构建的问题解决了吗？我也是卡在这已经几个月了？求教~谢谢~
赞一下 回复此楼
3楼2017-08-17 11:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)
我在苏州泓迅做的，挺好挺快
赞一下 回复此楼
冷风过心变热
4楼2017-08-17 13:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tong929319 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +5 小张zxy张 2026-03-26 10/500 2026-03-31 00:29 by jp9609
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:01 by dophin1985
[考研] 317求调剂 +8 十闲wx 2026-03-24 8/400 2026-03-30 21:00 by peike
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
[考研] 289求调剂 +16 新时代材料 2026-03-27 16/800 2026-03-30 19:04 by Wang200018
[考研] 287求调剂 +14 land xuxu 2026-03-26 14/700 2026-03-30 18:38 by 544594351
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭