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新虫 (初入文坛)

[求助] 非变性凝胶电泳

我现在在跑非变性胶，浓缩胶5%，分离胶7.5%，电极缓冲液ph 8.3。有条带的是购买的marker，我的样品是酸性蛋白，无论我把pH调到酸性、中性、还是碱性，都跑不出来。请问各位大神，这个原因可能是什么，我应该往哪个方面改进啊？这方面我是小白，请各位指导指导啊！

170519非变性胶-自制胶.jpg

1楼 2017-06-09 10:38:33

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新虫 (初入文坛)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 端粒酶~ at 2017-06-11 00:02:15
这得根据你目的蛋白的分子量，再来确定分离胶的浓度，，maker出来的话，，估计你蛋白分子量比较小。

我的marker是66-669kD的，样品在这个范围内，另外marker中各蛋白的等电点在4-5左右，样品的等电点在5.5左右，所以应该不是这两个方面的原因吧。还有什么其他可能的原因吗？

3楼2017-06-11 21:06:24

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新虫 (初入文坛)

这得根据你目的蛋白的分子量，再来确定分离胶的浓度，，maker出来的话，，估计你蛋白分子量比较小。

发自小木虫Android客户端

2楼2017-06-11 00:02:15

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新虫 (初入文坛)

我遇到和你同样的问题，请问你的问题解决了吗

4楼2017-11-09 17:31:42

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