24小时热门版块排行榜    

查看: 2389  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小小丫头爱

银虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒双酶切后 点样跑胶 没有目的基因的条带

重组质粒双酶切后 点样跑胶 没有目的基因的条带 具体问题及实验流程 均在附件中详细说明了 请各位大神帮忙
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 质粒构建问题.doc
  • 2017-06-05 20:14:16, 466 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

慎终如始
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小丫头爱

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 铭记于心2222 at 2017-06-05 21:11:50
没有条带说明没有构件成,我觉得连接体系有问题,dna总量太小,150-200ng  质粒基因摩尔比1:10试试  图4看着向菌落pcr图吧?菌落pcr不准

没有做菌落PCR 质粒和目的基因的比例是按照3:1设置的 会不会是没有酶切好啊?怎么看有没有酶切好呢?还有质粒什么情况下会发生自连啊?

发自小木虫Android客户端
慎终如始
3楼2017-06-06 09:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)

没有条带说明没有构件成,我觉得连接体系有问题,dna总量太小,150-200ng  质粒基因摩尔比1:10试试  图4看着向菌落pcr图吧?菌落pcr不准

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2017-06-05 21:11:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)

只有一个酶起作用了,连接酶就连上了   双酶切彻底就不会自连了  你把你双酶切产物直接转化,按理说不会长菌,这么做可以看看你酶切效果

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2017-06-06 12:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小丫头爱

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 铭记于心2222 at 2017-06-06 12:59:43
只有一个酶起作用了,连接酶就连上了   双酶切彻底就不会自连了  你把你双酶切产物直接转化,按理说不会长菌,这么做可以看看你酶切效果

我设置了对照组 就是只有载体片段 没有目的片段的T4酶连接体系 转化感受态细胞 涂布平板 没有长出菌落 可是我的实验组 长出菌落的 进行挑菌 提质粒 进行双酶切 就是只有载体的条带 没有目的片段的条带 是怎么回事?
慎终如始
5楼2017-06-12 09:00:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见