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Lulu与璐璐

新虫 (正式写手)

[求助] 求各位生物专业类大神解惑!!!急~~ 已有2人参与

本人生物类专业本科一枚,毕业课题中的内容有一点儿疑惑:克隆得到一个基因片段,通过酶切连接的方法与L4440质粒构成重组质粒,转化感受态细胞,涂板后挑取了单菌落。摇菌培养后,直接以基因片段的引物为引物,以菌液为模版进行PCR,扩出来的电泳条带会比直接克隆得到的基因片段条带大200bP左右吗?
这是正常现象吗?
为什么会出现这种现象啊?
请各位生物专业类大神答疑解惑~
十分感谢!!!

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Lulu与璐璐

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stephen.xie at 2017-06-05 07:56:22
不会吧,没遇到过,建议再p一次

在小木虫中一些帖子中也出现了类似的情况~构建的两个基因片段都是酱紫的情况~

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5楼2017-06-05 21:33:01
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stephen.xie

铁虫 (正式写手)

不会吧,没遇到过,建议再p一次

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2楼2017-06-05 07:56:22
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伤何处

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-06 07:47:38
你是怎么知道长200bp左右?因为对于比较大的片段,差200bp在电泳时不太好区别的。还有你做菌液PCR的时候,是拿之前的基因片段做阳性对照么?然后一起跑胶?
不用太纠结这个结果,送去测序之后就知道 到底有没有多200bp了  

祝实验顺利

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对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
3楼2017-06-05 11:21:25
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Lulu与璐璐

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 远望集团 at 2017-06-05 19:39:05
可以测个序看看

测序结果显示无误

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6楼2017-06-05 21:33:22
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