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雨巷12

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因测序审稿人问题回复求助,急急急! 已有1人参与

各位大神,投稿时审稿人提了两个关于基因测序的问题:How did the authors rarefy the data? What is the threshold for the rarefaction?但是我不知道怎么回答,也不知道是从哪方面回答,怎样稀释数据?稀释的阈值?这个rarefy到底是什么意思呢?问测序公司,测序公司也不知道怎么回答,谁能帮忙解决?谢谢。。。感激不尽。。。
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
paperhunter: 金币+3, 鼓励交流 2017-04-27 23:35:15
测序里面rarefraction是稀释度的意思,可以用来衡量测序深度的。就是说你的样品测多少条序列,这些序列通过软件,比如R语言或者Mothor等在100-97-95-90-85%等水平有多少个OTUs。比如测了100序列,如果都不一样,对角可以画一条线是不是,如果发现70个很不一样,那么就是曲线了,如果发现只有10来个不一样,其他都一样,说明大部分都测到了,多是重复序列。那么曲线就接近跟x轴平行了。这样的线就是rarefraction curves。结合你的内容看看

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
2楼2017-04-12 01:26:30
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
雨巷12: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2017-04-27 16:21:47
引用回帖:
9楼: Originally posted by 雨巷12 at 2017-04-12 15:22:53
测序深度会用到“rarefy”和“rarefaction”这两个词吗?测序公司倒是给了稀释曲线,也没有100%的线

84RAT}`KU}36SXK7KI)]817.png
...

就是这个东西,横轴是测序数量,这个你可以问公司的,问他们一个样品测了多少个序列。这个就是100%那个线的依据。此外,你问下你图中三条线分别表示%多少相似性。从你的图来看,测序深度是足够了。你可以把这个图附上,告诉审稿人,你测序保证有20万个序列/样品,这些数据是用什么软件分析的。稀释度曲线只是一个概念,当然就是为了描述测序深度的,没有别的用途。至于OTUs,Chao等是通过软件分析的结果,也会受测序深度的影响,不过跟稀释度之间是没有关系的。
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10楼2017-04-12 18:42:30
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

我认为第一个问题是问你:你的数据是通过什么手段进行分析的?rarefy也有精选、挑选的意思,其实就是用软件对你的数据经行统计的过程,即,稀释度分析过程;第二个问题是问你:你数据进行稀释度分析时的极限是多少,这个极限就是100%那个意思,即,测序深度(每个样品测的序列个数,稀释度曲线的X轴)。你回答问题可以谦虚点,最后加句话,说不知道我理解是否正确,还望多多指教(Please let me know if I misunderstand your comments)。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
11楼2017-04-12 18:47:01
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普通回帖

雨巷12

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 416114799 at 2017-04-12 01:26:30
测序里面rarefraction是稀释度的意思,可以用来衡量测序深度的。就是说你的样品测多少条序列,这些序列通过软件,比如R语言或者Mothor等在100-97-95-90-85%等水平有多少个OTUs。比如测了100序列,如果都不一样,对角 ...

非常感谢您的回复,我差不多可以理解,再麻烦问您一下这个 threshold for the rarefaction是从哪里看呢?我问测序公司他们也不清楚,这个是自己设置的数值吗?还是默认的?稀释曲线和多样性指数,如chao指数和Shannon指数有联系吗?
3楼2017-04-12 12:22:59
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4楼2017-04-12 12:39:15
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雨巷12

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 在线侯编辑 at 2017-04-12 12:39:15

谢谢
5楼2017-04-12 14:07:48
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨巷12 at 2017-04-12 12:22:59
非常感谢您的回复,我差不多可以理解,再麻烦问您一下这个 threshold for the rarefaction是从哪里看呢?我问测序公司他们也不清楚,这个是自己设置的数值吗?还是默认的?稀释曲线和多样性指数,如chao指数和Shan ...

我理解会不会就是你的测序深度的意思,我们测序都会有一个测多少个的数值,所谓的阈值。不知道你是否没有画稀释度曲线图?根据图可以看出来的,就是我说的那个100%的线。OTUs跟CHAO等是有关系的,软件计算会自己给出来的。可参考下面文献?Arsenic?and?phosphate?rock impacted the abundance and diversity of bacterial arsenic oxidase and reductase genes in rhizosphere of As-hyperaccumulator?Pteris vittata

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6楼2017-04-12 14:33:29
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

此外,你得说你用什么方法进行测序深度分析,比如R语言?还是Mothot

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7楼2017-04-12 14:35:22
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

你的分析方法就是他要你回答的第一个问题了

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8楼2017-04-12 14:35:50
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雨巷12

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 416114799 at 2017-04-12 14:33:29
我理解会不会就是你的测序深度的意思,我们测序都会有一个测多少个的数值,所谓的阈值。不知道你是否没有画稀释度曲线图?根据图可以看出来的,就是我说的那个100%的线。OTUs跟CHAO等是有关系的,软件计算会自己给 ...

测序深度会用到“rarefy”和“rarefaction”这两个词吗?测序公司倒是给了稀释曲线,也没有100%的线
基因测序审稿人问题回复求助,急急急!
84RAT}`KU}36SXK7KI)]817.png

9楼2017-04-12 15:22:53
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