| 查看: 5742 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
jinnini125木虫 (小有名气)
|
[求助]
关于原核表达诱导条件 已有3人参与
|
||
本人用的是全式金的原核表达载体，根据说明书37度诱导，设置时间梯度3.4.5三个梯度，IPTG浓度设置0.6 0.8 1.0三个梯度。未诱导的作为对照跑SDS-PAGE胶，结果如图。目的条带大约26KD，MARKER指示带倒数第一是20KD左右，第二是29KD左右。 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有182人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-09 22:16:03
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-09 22:16:03
|
裂解不就是破碎细胞，用超声波细胞破碎仪。然后看看破碎后菌液有没有澄清，基本上澄清了就很少是包涵体，然后离心。取沉淀和上清，上清去纯化就好了。再跑胶看看有没有 发自小木虫IOS客户端 |
12楼2017-03-27 12:24:44
fengshen2005
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2622.9
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 518
- 在线: 80.2小时
- 虫号: 2251556
- 注册: 2013-01-20
- 专业: 免疫学
jinnini1252楼2017-03-23 22:33:54
fengshen2005
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2622.9
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 518
- 在线: 80.2小时
- 虫号: 2251556
- 注册: 2013-01-20
- 专业: 免疫学
3楼2017-03-23 22:34:53
xinxiyuzhou
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 78 (初中生)
- 金币: 13452.5
- 散金: 55
- 红花: 19
- 帖子: 2045
- 在线: 425小时
- 虫号: 1304974
- 注册: 2011-05-24
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-09 22:15:38
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-09 22:15:38
|
应该是表达了，你收集菌体，裂解一下，分别跑一个裂解液上清和沉淀看是包涵体还是可溶性表达，一般情况下不用摸时间和IPTG浓度和温度梯度，37℃，4到6小时，iptg1mm就可以，做多了只是增加工作量，如果是包涵体表达，就需要考虑前面的因素了，你跑的这个胶没有太大意义，连未诱导的对照也没有，所以没法给你建议，做实验一定要设置阴性对照 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2017-03-23 23:17:24
