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JaneLee

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质含量测定的方法 已有2人参与

要测蛋白质含量,是不是需要提取所测材料的蛋白质,提纯后再选择实验方法测?众多实验测定方法里,你们都用哪些?考马斯亮蓝染料法?双缩尿?凯氏定氮法?有没有什么仪器呢

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小木山203

新虫 (小有名气)

2楼2017-03-08 21:40:04
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JaneLee

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小木山203 at 2017-03-08 21:40:04
BCA法测蛋白

需要提蛋白质吗?用什么提呢?

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3楼2017-03-08 22:36:16
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啦啦啦咿呀

新虫 (正式写手)

标准曲线测定吧…需要纯化

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4楼2017-03-09 13:08:06
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JaneLee

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小木山203 at 2017-03-08 21:40:04
BCA法测蛋白

你们都是怎么做的呢?有机溶剂提取后再用BCA测?

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5楼2017-03-09 21:14:47
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JaneLee

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 啦啦啦咿呀 at 2017-03-09 13:08:06
标准曲线测定吧…需要纯化

你们都是怎么做的呢?有机溶剂提取后再用BCA测?

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6楼2017-03-09 21:15:16
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kunkuncow

新虫 (小有名气)

方式分额
7楼2017-03-09 21:56:37
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小木山203

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by JaneLee at 2017-03-09 21:14:47
你们都是怎么做的呢?有机溶剂提取后再用BCA测?
...

蛋白不能用有机溶剂测吧,我也是外行,路过

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8楼2017-03-09 22:11:23
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中洪小刘

新虫 (小有名气)

您好,有考虑过给专业的生物公司做吗,我这边希望能帮到您

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9楼2017-03-11 13:55:57
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plantviro

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要测蛋白质含量,是不是需要提取所测材料的蛋白质,提纯后再选择实验方法测?
根据你的问题我来回答我做过的实验内容。我提取的是植物总蛋白,为了比较两个样品组之间某一个蛋白的含量差异(我有该蛋白的抗体,后期做western blotting),通过加入2-巯基乙醇的总蛋白提取液获得总蛋白后,通过BCA试剂盒(我用的是天根生化产品)先制作标准曲线,获得公式,同时测定我提取液中蛋白的含量(一般提取液需要稀释一下再测,容易不在标准曲线内的话,测量值不好利用公式反推出浓度。)
在我的实验,不需要特别的仪器,实验需要总蛋白提取液、离心机、分光光度计(试剂盒详细说明了波长的)、比色皿。
学海无涯苦做舟,乐做浆
10楼2017-03-13 10:25:22
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