应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Ni柱纯化充足蛋白
71/1返回列表
查看: 1151  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yml11

新虫 (初入文坛)

[求助] Ni柱纯化充足蛋白 已有2人参与

各位大神，请教一下。我的蛋白是24kDa左右，用Ni-NTA纯化蛋白，图一是梯度20，50，100，150，250，250，300，400，500mM咪唑洗脱的图。后选择400mM作为洗脱浓度，但这次做出来还是有很多杂蛋白，请问是怎么回事呢？图2倒数第三条带是洗脱合并后过10kDa超滤的结果。

Ni柱纯化充足蛋白


Ni柱纯化充足蛋白-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-03-07 21:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-08 07:41:50
再过一个离子交换柱吧，Ni柱很难达到一次性纯化的效果，除非你蛋白产量超高
赞一下 回复此楼
2楼2017-03-08 00:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酵母君HSJ

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单单过亲和很难到达一步纯化的，我们还会过一次凝胶层析或者离子交换
赞一下 回复此楼
3楼2017-03-08 14:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yml11

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 绝对零度的笑 at 2017-03-08 00:08:52
再过一个离子交换柱吧，Ni柱很难达到一次性纯化的效果，除非你蛋白产量超高

那过阴离子还是阳离子交换柱呀？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-03-09 10:51:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郭小勺

新虫 (初入文坛)
感觉蛋白有些降解

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-03-09 20:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绝对零度的笑

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yml11 at 2017-03-09 10:51:48
那过阴离子还是阳离子交换柱呀？
...

阴离子交换柱居多吧，看你的蛋白等电点是多少了
赞一下 回复此楼
6楼2017-03-09 23:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辉102526

新虫 (初入文坛)
恩，Ni-400前多长时间低咪唑洗，或者再过阴阳柱

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-03-13 00:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yml11 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭